MM_FS_CNJ_0272 出口粮谷及油籽中丰索磷残留量检验方法

MM_FS_CNJ_0272出口粮谷 油籽 丰索磷 残留量 气相色谱法 外标法定量

MM_FS_CNJ_0272

出口粮谷及油籽中丰索磷残留量检验方法

1.适用范围

本方法适用于出口糙米、玉米、大豆、花生仁中丰索磷残留量的检验。

2.原理概要

试样中残留的丰索磷用水-丙酮提取，提取液经浓缩后与乙酸乙酯液-液分配，再以弗罗里硅土柱净化。被测物用丙酮-二氯甲烷洗脱，洗脱液经蒸干，残渣用乙酸乙酯溶解并定容，溶液供配有火焰光度检测器的气相色谱仪测定，外标法定量。必要时用气相色谱-质谱进行确证。

3.主要试剂和仪器

3.1.主要试剂

丙酮：重蒸馏；

乙酸乙酯：重蒸馏；

二氯甲烷：重蒸馏；

氯化钠；

无水硫酸钠：650℃灼烧4h，贮于密封容器中备用；

饱和氯化钠水溶液；

弗罗里硅土：层析用，100～200目，650℃灼烧5h，用前于130℃活化4h，冷却后加入5%(m/m)水脱活，贮于密封容器中备用；

丰索磷标准品：纯度≥99%；

丰索磷标准溶液：准确称取适量的丰索磷标准品，用少量的乙酸乙酯溶解，并以乙酸乙酯配制成浓度为1.00mg/mL的标准储备液。根据需要再用乙酸乙酯稀释成适用浓度的标准工作溶液。

3.2.仪器

气相色谱仪：配有火焰光度检测器(磷滤光片)及质谱检测器；

均质器；

旋转蒸发器；

无水硫酸钠柱：7.5cm×1.5cm(内径)，内装5cm高无水硫酸钠；

弗罗里硅土柱：25cm×1.5cm(内径)自下而上依次填装2cm高无水硫酸钠、10g弗罗里硅土、2cm高无水硫酸钠。使用前用50mL丙酮-二氯甲烷(1＋99)混合液预淋洗；

微量注射器：10μL。

4.抽样和制样

4.1.检验批

以不超过200t为一检验批。200t袋装糙米约4000袋；袋装玉米或大豆约2200袋；袋装花生仁约2400袋。玉米或大豆有时为散装品。

同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。

4.2.抽样数量

4.2.1.袋装货品

按式(1)计算抽样袋数：

a＝…………………………………(1)

式中：N —— 全批袋数；

a —— 抽样袋数。

注：a值取整数，小数部分向前进位为整数。

4.2.2.散积货品(玉米或大豆)

货堆高度不超过2m。按货堆面积划区设点。以50m²为一个取样区，每区设中心及四角(距边线1m处)5个点。每增加一个取样区，增设3个点。

4.3.抽样工具

金属单管取样器：全长55cm(包括手柄)，直径1.5～2.0cm，沟槽长度应超过袋对角线长度的一半；

金属双套管取样器：全长分1m、2m(均包括手柄)两种。内、外管同部位分段开几个槽口，每个槽口长15～20cm，口宽2.0～2.5cm。内管的内径为2.5～3.0cm；取样器的探头长约7cm；

取样铲或取样勺；

分样板；

盛样器：筒或袋，可密封；

分样布或适用铺垫物。

4.4.抽样方法

4.4.1.袋装抽样

倒包抽样：从堆垛的各部位随机抽取4.2.1规定的应抽样袋数的10%(每批一般不少于3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角，提起约成45°倾角，倒拖约1m，使袋内货物全部倒出。查看袋内和袋间品质是否均匀。确认情况正常后，用取样铲随机在各部位抽取样品，并立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的数量应基本一致。

袋内抽样：按4.2.1规定的应抽样袋数(扣除倒包抽样袋数)，在堆垛四周的上、中、下各层以曲线形走向随机抽取。然后按糙米、玉米、大豆、花生仁，用下述方法进行取样：

对糙米，用金属单管取样器槽口朝下，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后将管槽旋转朝上，抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。

对玉米或大豆，用1m长的金属双套管取样器，关闭槽口，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后旋转内管以开启槽口，待样品流满内管后，再旋转内管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。

对花生仁，将应抽各袋拆开袋口缝线3～5针，用取样勺从开口处抽取样品。立即缝好袋口，并将所取样品倒入盛样器内。

每袋抽取样品的数量应与4.4.1.1基本一致。每批所抽取的样品总量应不少于4kg。

4.4.2.散积抽样(用于玉米、大豆)

按4.2.2规定的取样点，逐点抽取样品。将取样器槽口关闭，以倾斜45°角度插入货堆至相应深度，旋转取样器内管以开启槽门，待样品流满内管后，再旋转内管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内，从各点所抽取样品的数量应基本保持一致。

每批所抽取的样品总量应不少于4kg。

4.4.3.大样缩分

袋装样品：合并从倒包和袋内抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分样品至不少于2kg，倒入盛样器内，加封后标明标记，并及时送交实验室。

散积样品：将抽取的全部样品，倒于分样板上，以下按上述袋装样品方法进行。

4.5.试样制备

4.5.1.制样工具

磨碎机；

粉碎机；

筛子：20目筛，2.0mm圆孔筛；

分样板；

盛样瓶：具塞广口瓶。

4.5.2.制样方法

糙米、玉米或大豆试样制备：将样品按四分法缩分至1kg，用磨碎机全部磨碎并通过20目筛。混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样瓶内，密闭，标明标记。

花生仁试样制备：将样品按四分法缩分至500g，用粉碎机粉碎，使全部通过2.0mm圆孔筛。混匀，均分成两份作为试样，分别装入洁净的盛样瓶内，密闭，标明标记。

4.6.试样保存

将试样于－5℃以下避光保存。

注：在抽样及制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。

5.过程简述

5.1.提取

称取试样约10g(精确至0.1g)于250mL具塞锥形瓶中，加入20mL水，放置2h。然后加入100mL丙酮，高速均质提取5min。将提取液抽滤于250mL梨形瓶中，残渣再用50mL丙酮重复提取一次，合并滤液于上述梨形瓶中。于40℃水浴中旋转浓缩至约20mL。

将此溶液移入500mL分液漏斗中，加入50mL饱和氯化钠水溶液和100mL乙酸乙酯，振摇5min，静置分层。收集上层有机相。水相再用100mL乙酸乙酯重复提取一次，合并有机相。经无水硫酸钠柱脱水，收集于250mL梨形瓶中，于40℃水浴中旋转浓缩至近干，加入5mL丙酮-二氯甲烷(1＋99)以溶解残渣。

5.2.净化

将溶解液倾入弗罗里硅土柱中，用100mL丙酮-二氯甲烷(1＋99)进行淋洗，弃去流出液，然后用100mL丙酮-二氯甲烷(5＋95)进行洗脱。收集全部洗脱液于250mL梨形瓶中。于40℃水浴中旋转浓缩至近干，用乙酸乙酯溶解并定容至5.0mL，供气相色谱测定。

5.3.测定

5.3.1.色谱条件

色谱柱：25m×0.32mm(内径)，膜厚0.25 μm，HP-1 701石英毛细管柱，或相当者；

色谱柱温度：程序升温50℃(2min)  ^30℃/min  220℃(1min)  ^4℃/min  260℃(1/min)；

进样口温度：270℃；

检测器温度：280℃；

载气：氮气，纯度≥99.99%，2mL/min；

氢气：75mL/min；

空气：100mL/min；

尾吹气：氮气，纯度≥99.99%，50mL/min；

进样方式：无分流进样，1.5min后开阀；

进样量：2μL。

5.3.2.色谱测定

根据样液中被测农药含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和待测样液中农药的响应值均应在仪器检测的线性范围内。对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，丰索磷的保留时间约为14min。标准品的气相色谱图见附录A中图A1。

5.4.确证

5.4.1.气相色谱-质谱条件

色谱柱：30m×0.25mm(内径)，膜厚0.25μm，OV-17石英毛细管柱，或相当者；

色谱柱温度：程序升温50℃(2min) ^30℃/min  220℃(1min)  ^6℃/min  270℃(5min)；

进样口温度：270℃；

色谱-质谱接口温度：260℃；

载气：氦气，纯度≥99.99%，1.4mL/min；

进样量：1μL；

进样方式：无分流进样，1.5min后开阀；

电离方式：EI；

电离能量：70eV；

电子倍增器电压：1.5kV；

测定方式：选择离子监测方式；

选择监测离子(m/z)：293，295，308 amu；

溶剂延迟：10min。

5.4.2.质谱确证试验

对标准溶液及样液均按5.4.1规定的条件进行测定时，如果样液与标准溶液有保留时间相同的峰出现，则用质谱图对其确证。在上述色谱-质谱条件下，丰索磷的保留时间约为18min。标准品的色谱-质谱图见附录B中图B1。

5.5.空白试验

除不加试样外，均按上述测定步骤进行。

6.结果计算

用色谱数据处理机或按式(2)计算试样中丰索磷残留含量：

式中：X —— 试样中丰索磷残留含量，mg/kg；

h —— 样液中丰索磷的色谱峰高，mm；

h_s —— 标准工作液中丰索磷的色谱峰高，mm；

c —— 标准工作液中丰索磷的浓度，μg/mL；

V —— 样液最终定容体积，mL；

M —— 最终样液所代表的试样量，g。

注：计算结果需将空白值扣除。

7.低限、回收率的测定

7.1.测定低限

本方法的测定低限为0.020mg/kg。

7.2.回收率

7.2.1.糙米中丰索磷的添加浓度及其回收率实验数据：

在0.020mg/kg时，回收率为93.0%；

在0.10mg/kg时，回收率为88.0%；

在0.50mg/kg时，回收率为91.5%。

7.2.2.玉米中丰索磷的添加浓度及其回收率实验数据：

在0.020mg/kg时，回收率为91.2%；

在0.10mg/kg时，回收率为91.5%；

在0.50mg/kg时，回收率为88.7%。

7.2.3.大豆中丰索磷的添加浓度及其回收率实验数据：

在0.020mg/kg时，回收率为97.2%；

在0.10mg/kg时，回收率为.0%；

在0.50mg/kg时，回收率为90.9%。

7.2.4.花生仁中丰索磷的添加浓度及其回收率实验数据：

在0.020mg/kg时，回收率为87.2%；

在0.10mg/kg时，回收率为87.5%；

在0.50mg/kg时，回收率为.0%。

8.来源：

SN.0688—1997