ＨＥＩＬＯＮＧＪＩＡＮＧ ＭＥＤＩＣＩＮＥ ＡＮＤ ＰＨＡＲＭＡＣＹ Ｏｃｔ．２００８，Ｖｏ１．３１ Ｎｏ．５ ・７。 五味子乙素对Ｈ 荷瘤小鼠抑制作用的病理学研究 金岳雷，范晓艳，吕冬霞，张玉萍 （佳木斯大学基础ｔｔ学院，黑龙江佳木斯１５４００７） 摘要：目的：研究五味子乙素、顺铂和两者联合应用时Ｈ 荷瘤鼠的抑瘤作用。方法：建立小鼠Ｈｚｚ实体瘤模型，对Ｈｚ２小鼠 进行五味子乙素、顺铂和两者联合处理，瘤体经ＨＥ染色，镜下观察瘤体体积和病理学变化。结果：五味子乙素可在一定程度上 使瘤细胞退变、凋亡，有较轻抑瘤形态学表现。五味子乙素合并顺铂有较强抑瘤作用。结论：五味子乙素具有一定的抑瘤作用， 其抑瘤作用可能与细胞凋亡、活化免疫细胞有关。且五味子乙素与顺铂合用可使抑瘤作用增强。 关键词：五味子乙素；顺铂；抑瘤作用；病理学 中图分类号：Ｒ７３Ｏ．２；Ｒ７３—３６文献标识码：Ａ文章编号：１００８—０１０４（２００８）０５—０００７一Ｏ１ 中药五味子是木兰科植物五味子的干燥成熟果实，中医 １．２．３测算体积抑瘤率 临床常用药材之一，具有敛肺、滋肾、生津、收汗、涩精之功 第８天（从给药第一天计算）将小鼠处死，解剖出小鼠的 效。五味子的化学成分主要有五味子木脂素、挥发油、五味子 肿瘤，用滤纸吸去血液后，以１０％福尔马林液固定。取肿瘤最 醇、多糖等Ｃ 。目前，从五味子的干燥成熟果实中又提取出了 大切面石蜡包埋切片，ＨＥ染色，光镜检测：瘤体切片最长径 五味子乙素（ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ，ＳｃｈＢ）。已有研究表明，五味子乙 （ａ），最短径（ｂ），按Ｖ—ａｂ。／２计算肿瘤体积【３］。用（对照组肿 索可诱导肿瘤细胞凋亡¨２］，为进一步研究其抗肿瘤机制，本 瘤平均体积一实验组肿瘤平均体积）／对照组肿瘤平均体积 实验建立小鼠实体瘤模型．通过病理切片观察其对瘤体的影 ×１ＤＯ 计算体积抑瘤率 Ｊ。 响情况。 １．２．４病理学形态观察 １材料与方法 镜下观察ＨＥ片瘤细胞异型性、瘤细胞退变、坏死、凋亡 １．１ 材料 情况。病理分级如下：从瘤细胞的大小、染色深度、形态、染色 实验动物：昆明种近交系小鼠，体重（２０土２．Ｏ）ｇ，雄性， 体的分布观察：（１）瘤细胞异型性 ０：异型性不明显；＋：轻度 购于佳木斯大学实验动物中心，许可证号：黑动字第 异型性；＋＋：中度异型性；＋＋＋：高度异型性。（２）瘤细胞 ９９１０１００１，普通级．普通环境饲养；细胞株：Ｈ。ｚ腹水瘤小鼠购 退变。０：无退变；＋少量退变；＋＋退变明显。（３）瘤细胞坏 于哈尔滨医科大学附属肿瘤医院动物中心；五味子乙素：成 死、凋亡。ｏ：无细胞坏死或凋亡；＋：少量细胞坏死或凋亡；＋ 都巨邦生物工程有限公司惠赠；顺铂（ＤＤＰ）：中国山东省德 ＋：较多细胞坏死或凋亡；＋＋＋：伴有钙化。 州制药厂，批号２００７０５１６；光学显微镜：Ｏｌｙｍｐｕｓ公司 １．２．５数据处理 １．２方法 １．２．１ 动物分组 将接种Ｈ 。瘤种８ｄ的腹水瘤小鼠以脱颈法处死，无菌条 件下抽取腹水瘤细胞悬液５ｍＬ，经离心稀释，用生理盐水重 新悬浮细胞，细胞悬液浓度为１×１０１ｏ／Ｌ。以０．２ｍＬ／只接种于 被试的４Ｏ只昆明种小鼠右腋下，制成实体瘤动物模型。于接 种２４ｈ后，将４Ｏ只被试小鼠随机分成４组：对照组、五味子乙素 组、顺铂组、五味子乙素＋顺铂组。 １．２．２给药方式 采用ＳＡＳ１０．０进行数据统计分析。组间比较用独立样本 的ｇ检验，组内比较用方差分析。 ２结果 ２．１ 实验各组小鼠瘤体体积变化情况 见表２。 表２不同处理条件下小鼠瘤体体积及体积抑瘤率（７ｒ士ｓ，ｎ＝１０） 每日早晨进行腹腔注射一次，晚上进行灌胃一次，连续 给药７ｄ，具体给药方法见表１。 表１ 实验动物的给药种类与用量 组别 腹腔注射 ０．２ｍＬ） 灌胃（Ｏ．４ｍＬ） 注：与对照组比较 Ｐ＜０．０１。 ２．２实验各组荷瘤小鼠瘤体病理学观察 见表３。 表３不同处理条件下荷瘤小鼠瘤体（；士Ｓ，ｎ一１０） 注：与对照组比较 Ｐ＜ｏ．０５．一尸＜ｏ．Ｏｌ。 结果显示对照组瘤体体积较大，瘤细胞异型性程度较 高，瘤细胞凋亡与退变较少。五味子乙素组瘤体体积比对照 组明显减小，瘤细胞异型性降低．瘤细胞退变明显，凋亡增 加．有轻度抑瘤形态学表现．顺铂组瘤体体积较小，瘤细胞异 型性降低，瘤细胞退变明显，凋亡与坏死较多，部分坏死灶内 可见钙化，五味子乙素联合顺铂组瘤细胞大部分已退变与 纤维化，凋亡增多，瘤细胞生长被抑制现象明显。联合组与中 药组比较有统计学意义（Ｐ＜０．Ｏ１）。在Ｃ凋亡中，联合组与 顺铂组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。在异型性中，联合组 与顺铂组比较有统计学意义（Ｐ＜０．０５）。 ３讨论 物，虽然能够抑制肿瘤细胞的过度增生，然而毒副作用较大， 并且长期使用易产生耐药性，影响疗效。五味子乙素是从中 药五味子中提取出来的有效成分，研究表明五味子乙素一次 ２ｇ／ｋｇ灌胃，１０只小鼠无一死亡。在小鼠亚急性实验中，以浓 度２００ｍｇ／ｋｇ每天一次，连续３０ｄ灌胃，对小鼠生长、血红蛋 白量及主要脏器的组织形态均无明显影响 ］。本异型性的改 变来看，五味子乙素、顺铂及二者联合都对肿瘤具有抑制作 用。观察显示五味子乙素作用于肿瘤时，表现出轻度的抑瘤 形态学变化，细胞出现凋亡特征，而瘤细胞坏死则与对照组 比较无差异；说明五味子乙素的抑瘤作用可能不是直接杀死 瘤细胞，而可能与肿瘤细胞凋亡有关。五味子乙索与顺铂联 合应用时，凋亡细胞与顺铂组比较有差异，说明五味子乙素 对顺铂具有增效作用 恶性肿瘤是目前威胁人类健康的主要疾病之一，临床上 普遍采用放化疗的方法进行治疗，顺铂是较为常用的化疗药 （下转第８页） ・８・ 黑龙江医药科学 ２００８年１Ｏ月第３１卷第５期 无痛支气管镜检查术７Ｏ例临床观察 邱 超 （佳本斯市结核医院，黑龙江佳木斯１５４００７） 关键词：支气管镜；无疼痛；检查术 中图分类号：Ｒ７６８．１文献标识码：Ｂ文章编号：１００８－－０１０４（２００８）０５—０００８一Ｏ１ 目前支气管镜是呼吸科及胸外科医生的好帮手．支气管 表１ 两组副作用对比（例） 镜检查术是Ｉ临床医生不可缺少的手段，患者对此项技术具有 恐惧感．不乐意接受检查，或担心术中、术后有一定的副作 用。从２００６年起，我们开展无痛支气管镜检查术，至今已有７Ｏ 例病人接受此项检查术．取得满意效果，报道如下。 经统计学处理两组对比均无差异（Ｐ＞０．０５）。 １临床资料 表２ 两组满意度调查对比（％） １．１病例选择 ７Ｏ例病人来源于我院住院及门诊病人．均自愿要求接受 无痛支气管镜检查术 １．２术前准备 在检查前．向病人及家属交代病情及相关的知情权。并 签好协议书。病人均有胸片．或者胸部ＣＴ，术前检查心电、肺 功、血常规、肝系列、Ｈ１Ｖ等检查。术前禁饮水２ｈ，禁食６ｈ。 ２方法 两缀满意度比较有显著差异（Ｐ＜ｏ．Ｏ１） ４讨论 临床采用多科室合作（麻醉科），再采用心电和血氧监护 下，应用眯唑安定或丙泊酚药物，在麻醉医生的指导下给药， 实施支气管镜检查。检查步骤同支气管镜常规检查步骤。适 应证同支气管镜检查适应证。 ３结累 随机取样以往７Ｏ侧支气管镜检查术病人作对照组．同现 有的无痛支气管镜检查术７Ｏ例病人从副怍用和病人满意度 作以下对比，见表１～２。 支气管镜检查术是呼吸内科医生重要手段之一，也为胸 外科医生手术指明方向和术式，改善病人的检查方法，减少 病人的痛苦和不适感，开展无痛支气管镜检查术是内镜医生 和病人共同追求的最为时尚最为实用的技术。减轻病人的痛 苦，减少术中并发症，提高检查阳性率，是医生最大的心愿。 从以上７Ｏ例病人及随机取样检查结果对比，无痛支气管镜检 查术从副作用及病人的满意度都符合我们的要求。采取多科 室合作，有麻醉科医生的支持和保驾护航．风险系数明显降 低，无痛支气管镜检查术的开展和应用有广阔前途．具有很 高的操作性，具有一定的推广和传播意义， （收稿日期：２００８一Ｏ８—０４） 作者简介：邱超（ｔ９７２￣）男，黑龙江佳木斯人，副主任医师，学士。 顺铂合用其体积抑瘤率６９．ｏ８％．比两者单独作用抑瘤率高， ［２］顾颖，李凌． 子乙索促进多柔比星诱导肝癌细胞ＳＭＭＣ７７２１ 罾芒 毒 ・曼 羹 耄罂 案。今 塑对五味子乙素增效作用的机理臻 煮＇６ ， ・矍舅 摆 ． 薏 量 。 襄 蔓 蠢蛋 ￣绞，股２０蓝０３总，２皂３（甙５）对：小４１２鼠－４ｓ１ ６ 。肉瘤及Ｋ ： 坚 ［ ］ 翼 …茹磊 莩 …薷若 。… 寻找最佳的肿瘤治疗方 … ’ 葑 ｏ ．…３５（５’。） ５１ ９ －５ ２１”… Ｌ一 ‘………一 霉 。美掌墨 ￣Ｕ ＵＺ ， ＺＳｔ ６） ：７ 麓和五味子乙素ｌ晶 动 参考文献，．．．． （收稿日期：２００８—０６—１６） ： 仕木斯大学科学研究项目，项目编号：￥２００７～３７ 作者简介：金岳雷（１９８Ｏ～）男，黑龙江大庆人，助教。 Ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ ｉｎ Ｈ ２２一ｂｅａｒｉｎｇ ｍｉｃｅ： Ｐａｔｈｏｌ ｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｉｅｓ ＪＩＮ Ｙｕｅ—ｌｅｉ，ＦＡＮ Ｘ 。一ｙａｈ，１Ｚ７ Ｄｏｎｇ－－ｘｉａ，ＺＨＡＮＧ Ｙｕ—ｐｉｎｇ （Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｂａｓｉｃ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ ｏｆ Ｊｉａｍｕｓｉ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｊｉａｍｕｓｉ １５４００７，Ｃｈｉｎａ） Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｔｈｅ ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ Ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｉｎ Ｈ２２一 ｂｅａｒｉｎｇ ｍｉｃｅ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｔｈｅ ｍｏｄｅｌ ｏｆ ｔｕｍｏｒ－－ｂｅａｒｉｎｇ ｍｉｃｅ ｗａｓ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｂｙ ｉｎｏｃｕｌａｔｉｏｇ Ｈ２ｚ ｃｅｌｌｓ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｓｕｂ— ｃｕｔａｎｅｏｕｓ ｔｉｓｓｕｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍｉｃｅ，ａｎｄ ｔｈｅｎ ｔｒｅａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ，ｃｉｓｐｌａｔｉｎ，ａｎｄ ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｓｐｌａｔ— ｉｎ．Ｔｈｅ ｔｕｍｏｒ ｓｉｚｅ ａｎｄ ｈｉｓｔｏｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｗｅｒｅ ｏｂｓｅｒｖｅｄ ｕｎｄｅｒ ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｙ ａｆｔｅｒ ＨＥ ｓｔａｉｎｉｎｇ．Ｒｅｓｕｌｔｓ： Ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｎｇｅｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｓｌｉｇｈｔ ｃａｔａ。——ｐｌａｓｉａ ａｎｄ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ｗｅｒｅ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｕｓｉｎｇ ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ｃｅｌｌｓ ｉｎ ｔｕｍｏｒ ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ。ｓｕｇｇｅｓｔｉｎｇ ｔｈａｔ ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｓｈｏｗｅｄ ｂｅｔｔｅｒ ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔ．Ｃｏｎｃｌ ｕｓｉｏｎ： Ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ ＣａＤ．ｉｎｈｉｂｉｔ ｔｕｍｏｒ ｇｒｏｗｔｈ，ｔｈｉｓ ｅｆｆｅｃｔ ｍａｙ ｂｅ ｃｏｒｒｅｌａｔｅｄ ｗｉｔｈ ａｐｏｐｔｏｓｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｍ— ｍｕｎｏｃｙｔｅｓ．Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎ，ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ ｃｏｍｂｉｎｅｄ ｗｉｔｈ ｃｉｓｐｌａｔｉｎ ｃａｎ ｐｒｏｍｏｔｅ ｔｈｅ ｃａｐａｃｉｔｙ ｏｎ ａｎｔｉ—ｔｕｍｏｒ ｉｎ Ｈ２２一 ｂｅａｒｉｎｇ ｍｉｃｅ． Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｓｃｈｉｓａｎｄｒｉｎ Ｂ；ｃｉｓｐｌａｔｉｎ；ａｎｔｉ－－ｔｕｍｏｒ ｅｆｆｅｃｔ；ｐａｔｈｏｌｏｇｉｃａｌ ｓｔｕｄｙ