白术药材的薄层色谱研究

白术药材的薄层色谱研究

【摘要】 目的成立白术薄层色谱辨别方式。方式以白术内酯Ⅲ为对照品，正己烷－醋酸乙酯（∶1）为展开剂，10%硫酸乙醇显色后在波长366 nm下检识。结果白术药材薄层色谱中,在与对照品色谱相应位置上显相同颜色的荧光斑点。结论该方式准确、简便，可为白术的质量操纵提供参考。

【关键词】 白术；薄层色谱辨别

Abstract:ObjectiveTo establish the quality control method of Atractylodes macrocephalae．Methods AtraetylenolideⅢ was used as the reference substance and the mixture of n-hexane and ethyl acetate :1) as the mobile alcohol solution containing 10% sulfuric acid was used for colouration in the way of sprayin. The fluorescence chromatogram was detected at 366nm in the ultraviolet lamp house .ResultsThe spots in the chromatogram of the test solution corresponding to the position to atraetylenolideⅢ had the same colour．ConclusionThe method is accurate and simple，and can be used for the quality control of this plant ．

Key words:Atractylodes macrocephalae； TLC

中药白术为菊科植物Atractylodes macrocephala Koidz.的干燥根茎，被《神农本草》列为上品，具有健脾益气、燥湿利水、止汗安胎功效。白术内酯Ⅲ是白术中的活性成份之一，经药理实验说明其有抗炎、抗癌作用［1～3］；另外，苍术、白术二者同源，功效较为接近，古时常不分二术，直到张仲景以后，始将二者分开利用。本研究通过对二者进行薄层的图谱比较，确信白术内酯Ⅲ为可区分白术和苍术的成份之一。本文以白术内酯Ⅲ为指标性成份，

成立白术薄层色谱辨别方式，以期为白术的质量操纵提供依据。

1 仪器与试药

半自动点样仪LINOMAT Ⅳ（瑞士CAMAG）；双槽展开缸 PF 562C（瑞士CAMAG）；薄层色谱摄像仪REPROSTAR 3（瑞士CAMAG）；薄层色谱视频摄像系统Videostore system（瑞士CAMAG）；薄层加热板 TLC Plate Heater III（瑞士CAMAG）；Sartorius BP211D型电子分析天平； KQ-250DB型数控超声波清洗器（昆山市超声仪器）。薄层板：硅胶H2预制板（10 cm×10 cm，20 cm×20 cm，烟台汇友硅胶开发），110℃活化60 min，新鲜制备。所用试剂均为分析醇（上海化学试剂公司）。白术内酯Ⅲ对照品均由上海中药标准化中心提供，经HPLC检测，其纯度在98%以上。用于薄层辨别的白术及苍术药材样品由上海中药标准化研究中心吴立宏博士鉴定。

2 方式与结果

对照品与供试品溶液制备

对照品溶液制备

称取白术内酯Ⅲ对照品适量，用甲醇溶解制成每毫升含 mg的对照品溶液。

供试品溶液制备

取本品中粉约 g，置100 ml具塞锥形瓶中，加甲醇10 ml，超声提取30 min，静置，滤过，滤液挥干，用1 ml甲醇溶解，即得供试品溶液。照薄层色谱法实验，别离吸取上述各样品的供试品溶液和对照品溶液各10 μl，别离用微升定量注射器借助半自动点样仪成条

带状点于同一块硅胶G板上，以正己烷－醋酸乙酯（∶1）为展开剂，预饱和20 min后上行展开8 cm，掏出晾干。喷以10％的硫酸乙醇溶液，105 ℃加热至斑点显色清楚，于366 nm下观看，供试品色谱中，在与对照药材，对照品色谱相应的位置上有相同的荧光斑点。见图1。

3 讨论

提取溶剂的考察

对正己烷、氯仿、甲醇3种溶剂进行了考察，以上提取溶剂取得的薄层色谱信息相同，考虑到经济性和方便性，最终确信甲醇超声提取30 min作为样品预处置方式。另外，对样品点样浓度进行了考察，最终确信的点样浓度如样品制备项下所述，既充分显示的斑点信息，又能保证样品不拖尾，不超载。 展开系统的优选

为取得最正确展开成效，实验了多种展开系统：正己烷－醋酸乙酯（3∶1，∶1,6∶1，5∶1，20∶1），石油醚－醋酸乙酯（3∶1，∶1,6∶1，5∶1），环已烷－醋酸乙酯（∶1，5∶1）。在以上实验基础上再进行优化，最后确信展开剂系统为正己烷－醋酸乙酯（∶1），该条件下取得的色谱分离度好，斑点清楚、Rf重复性好。

显色剂的选择

比较了5%香草醛/硫酸和10%硫酸乙醇溶液喷雾显色成效，5%香草醛硫酸显色后取得的色谱信息并非多，而10%硫酸/乙醇显色后取得的366 nm下荧光色谱信息较丰硕。

专属性辨别成份的确信

白术和苍术均为苍术属（Atractylodes）植物，白术临床要紧用于补脾气，性温，味甘，微辛带苦，功能健脾益气、燥湿利水、止汗安胎，用于脾虚食少、腹胀泄泻、痰饮、水肿、胎动不安等症，而苍术以燥湿为主，二者功效不同。古时常不分二术，直到张仲景以后，始将二者分开利用。从图1能够看出，在与对照品相同的位置上，苍术不显斑点，本实验用白术内酯Ⅲ作为白术的专属定性辨别成份比较适合。另外，用以上薄层色谱条件能够清楚的看出苍术和白术化学成份不同显著，但具体是何种成份有待进一步研究。

光和热对色谱信息的阻碍

另外，在试探白术薄层色谱条件时发觉，加热温度对样品色谱信息有阻碍，由图2中能够看出显色后随着温度的升高和加热时刻的增加，斑点会明显减少,苍术样品表现的更为突出,依照文献论文报导, 苍术酮很不稳固,对光对热都不稳固，会向白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ发生转化；白术内酯Ⅲ会在加热的条件下向白术内酯Ⅱ转化，这也印证了什么缘故白术内酯Ⅲ的颜色会随加热时刻发生转变（李伟.《白术的有效物质及质量研究》.南京中医药大学,2001硕士论文）。为此本实验用相同的实验条件重现该脱水反映，发觉与文献报导的白术内酯Ⅲ会脱水生成白术内酯Ⅱ并非一致，究竟生成何种物质，本课题组将作进一步研究。

白术药材的定性

辨别《中国药典》上采纳苍术酮在薄层层析板上的显色反映作为定性指标［4］。如图3所示，《中国药典》中以图中桃色的斑点（苍术酮）为检识斑点，但由于苍术酮为挥发油类化合物，性质不稳固，至今尚没有苍术酮的对照品，以此为检识斑点有待商议，本文成立的白术药材的苍术内酯Ⅲ定性辨别方式简捷易行，对实验室条件要求不高，结果直观，易于比较，可作为白术的定性辨别依据。

【参考文献】

［1］姚淑娟, 刘伯阳，孙艳．白术对荷瘤鼠NK和IL-２活性的阻碍［J］.医学研究通信,2005,34(12):52.

［2］李翠芹,贺浪冲.白细胞膜色谱模型成立与白术中TLR4受体拮抗活性成份挑选研究［J］.中国科学C辑·生命科学,2005,35(6):5.

［3］董海燕 ,董亚琳 ,贺浪冲，等.白术抗炎活性成份的研究［J］.中国药学杂志,2007, 42(14):1055.

［4］国家药典委员会.中国药典,Ⅰ部［S］.北京:化学工业出版社,2005:68.