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水蛭素基因hv2-47k及其合成与表达[发明专利]

来源:爱站旅游
专利内容由知识产权出版社提供

专利名称:水蛭素基因hv2-47k及其合成与表达专利类型:发明专利

发明人:黄秀东,游自立,吕志强,肖建国,于廷和,王立兵申请号:CN00129747.3申请日:20001010公开号:CN1348003A公开日:20020508

摘要:本发明是以天然水蛭素的二十多种变异体的氨基酸序列资料为依据,以HV2型水蛭素为原型,将其第47位天冬酰胺(N)替换为赖氨酸(K),选用甲醇酵母Pichia pastoris所喜好的遗传密码子,合成八段脱氧核苷酸片段(引物),采用递归式PCR(Recursive PCR)法进行拼接,最终得到可插入pPIC9质粒载体的新型水蛭素基因hv2-47k。hv2-47k基因在甲醇酵母Pichia pastoris中以分泌型表达,上罐发酵时,发酵液上清中新型水蛭素表达量不低于30,000ATU/ml(诱导50小时),相当于2.0g/L的产量,此为可检索文献中水蛭素表达量之首。

申请人:梅伯皋

地址:400060 重庆市南坪南四路中段刘永辉

国籍:CN

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