去冷沉淀血浆部分凝血因子及蛋白含量的研究

149

去冷沉淀血浆部分凝血因子及蛋白含量的研究

林昂

【摘要】　目的　探讨去冷沉淀血浆的临床应用价值,指导临床合理使用,并为国家行业标准的制订提供科学依据。方法　对来自同一袋血液新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆、去冷沉淀血浆三种标本,进行总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原、凝血因子Ⅷ、V、X含量检测,并进行统计分析。结果　去冷沉淀血浆与新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆相比,各项指标的差异都有统计学意义(P<0.01)。结论　去冷沉淀血浆不具备新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆的临床治疗价值。但在血栓性血小板减少性紫癜(TTP)等相关疾病的治疗上具有积极意义,应作为一种成分血进行制备和使用。

【关键词】　去冷沉淀血浆　　新鲜冰冻血浆　　普通冰冻血浆　　血浆蛋白　　凝血因子

【中图分类号】　R457.1+4　　R446.11　　【文献标识码】　A　　【文章编号】　1671-2587(2011)02-0149-02

　　去冷沉淀血浆是新鲜冰冻血浆在低温条件下分离冷沉淀后所得到的血液成分。目前,国内外输血行业对去冷沉淀血浆都没有明确规定或标准。美国血站和输血机构标准项目部质量管理分委会和美国血库学会标准项目委员会制定的《血站和输血机构标准》仅对去冷沉淀血浆的制备有规定,但没有明确规定或标准。为此,笔者对去冷沉淀血浆的部分凝血因子及蛋白含量进行检测,并与源自同一袋血液的新鲜冰冻血浆、普通冰冻血浆进行比较分析,现报告如下。

材料与方法

1　材料　随机抽取经体格检查、血液检验均合格的无偿献血者血样43份,其中男性25份,女性18份。均按正常献血过程使用ACD-B保养液血袋采集血液。

　　DOI:10.3969/J.issn.1671-2587.2011.02.020　　作者单位:515064　广东省汕头市中心血站

　　作者简介:林昂(1973-),男,汉,广东澄海人,副主任技师,本科,主要从事血液质量控制和血源管理工作。(E-mail)316524739@qq.com

2　试剂与仪器　凝血因子试剂均采用美国DADEBEHRING产品:标准人血浆(lot503208B)、Thromborel(lot545229)、缓冲液(lot527679)、氯化钙(lot539412)、APTT(lot537435)、乏V因子血浆(lot503546A)、乏Ⅷ因子血浆(lot536595A)、乏X因子血浆(lot504283A)、纤维蛋白原试剂盒(lot540272);总蛋白、球蛋白试剂(上海复星长征医学科学公司,lot2080622、2080752);TECOCOATRONM4血凝仪(德国TECO公司);BECKMAN全自动血凝仪;OLYMPUSAU400全自动生化仪(OLYMPUSOPTICALCO.);SDJ-20血浆速冻机(天津,天商冰冻科技公司);KJX-111冰冻血浆解冻箱(苏州医用仪器厂);J6M1大容量低温离心机(美国BECKMANCO.);MDF460B低温冰箱(日本SANYO.CO)。3　方法　血液采集后严格按照国家规定分离新鲜血浆,4h内速冻至-35℃,制备成新鲜冰冻血浆,同时留取血浆样本置4℃保存21d,作为普通血浆样本。第3天取出标本,按照试剂说明书操作,测定新鲜冰冻血浆的总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原、凝血因子V、Ⅷ、X含量;同时取出新鲜冰冻血浆按规程

[J].实验与检验医学,2008,26(6):697-698.

7　杨根元,金瑞祥,应武林.使用仪器分析[M].第2版.北

京大学出版社,1997:123-134.

8　徐向东,岳燕军,牛发良.甘油三酯试剂盒抗还原性干扰

的分析[J].张家口医学院学报,2003,20(1):14-15.9　向光大,韩芳,邓胜平,等.糖耐量受损患者维生素C对

葡萄糖负荷后内皮依赖性舒张功能功能的保护作用[J].中华内分泌代谢杂志,2006,22(3):258-259.

(收稿日期:2010-09-25)(本文编辑:蒋光明)

钾钠氯结果的影响[J].现代检验医学杂志,2006,21(2):39-40.

3　朱咏梅,陈峰.维生素C对改良J-G法测定血清胆红素

的负干扰[J].陕西医学检验,1996,11(2):48.

4　刘奉亭,梁继伟,柳忠旭,等.维生素C对葡萄糖测定的

干扰及其作用机制[J].青岛大学医学院学报,2001,37(1):50-52.

5　周爱儒.生物化学[M].第5版.北京:人民卫生出版社,

2003:394.

6　齐子芳.维生素C对血糖胆固醇甘油三酯测定的干扰

150

JClinTransfusLabMed,Apr.2011,Vol13,No.2

制备冷沉淀,留取制备冷沉淀后血浆测定其总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原、凝血因子V、Ⅷ、X含量;于第21天测定普通血浆样本的总蛋白、白蛋白、纤维蛋白原、凝血因子V、Ⅷ、X含量。

4　统计学处理　用SPSS软件进行统计学处理,采

用方差分析。

结　　果

　　检测得三种血浆中蛋白和部分凝血因子的含量见表1。

表1　三种血浆中蛋白和部分凝血因子含量(-x±s)

指标总蛋白(g/L)白蛋白(g/L)纤维蛋白原(g/L)Ⅴ因子(%)Ⅷ因子(%)Ⅹ因子(%)

新鲜冰冻血浆59.02±5.7038.21±2.532.43±0.5774.08±5.5372.66±4.5772.99±7.23

普通血浆56.21±5.3136.35±2.012.06±0.449.7±2.537.87±2.4958.44±6.06

去冷沉淀血浆48.85±3.6034.2±2.871.01±0.227.59±1.825.55±1.8243.03±6.91

F值48.3127.81123.48

P值<0.01<0.01<0.01

4572.83<0.016158.35<0.01211.61

<0.01

讨　　论

　　目前,国内外输血行业对去冷沉淀血浆都没有明确规定或标准,对其治疗疾病的作用无法做出预测和评估。为此,笔者检测了去冷沉淀血浆中部分凝血因子和蛋白含量,并对比检测同一献血者标本制备的新鲜冰冻血浆和普通血浆。

　　保存期内的新鲜冰冻血浆在1℃～6℃封闭状态下融化,在此条件分离出沉淀在血浆中的冷不溶解物质,且在1h内冻结而制成的成分血定义为冷沉淀,其分离得到的上清为去冷沉淀血浆,新鲜冰冻血浆中的Ⅷ因子、纤维蛋白原、纤vWF因子、维结合蛋白等主要保存在冷沉淀中。实验结果显示:去冷沉淀血浆中凝血因子及蛋白含量明显低于新鲜冰冻血浆,差异具有统计学意义。去冷沉淀血浆在临床上不能代替新鲜冰冻血浆用于补充体内各种凝血因子的缺乏。

部分同行认为去冷沉淀血浆只是去除了不稳定因子,对补充稳定因子和蛋白质还有一定的作用。有些血站和临床应用单位都把它等同普通血浆使用。从本次实验统计数据可以看出,去冷沉淀血浆的凝血因子和蛋白含量较普通血浆明显减少,不具备普通血浆的临床治疗价值。

血栓性血小板减少性紫癜(TTP)是由于血浆中vWF多聚体的异常积聚而直接引发的,致使患者血小板消耗而减少,同时微血管血小板性血栓形

[1]

成。在TTP血浆置换疗法中使用去冷沉淀血浆,有助于除去冷沉淀物中的vWF、凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原,在治疗血栓性微血管疾病方面具有广阔的前景。英国血液学标准委员会输血工作组于2004年发布的英国血液病协会新鲜冰冻血浆、冷沉淀和冷上清使用指南中指出:去冷沉淀血浆去除了Ⅷ因子和纤维蛋白原,缺乏vWF大分子量多聚体,但含有vWF金属蛋白酶。

从本研究结果可以看出:去冷沉淀血浆与新鲜血浆、普通血浆的凝血因子和蛋白含量存在明显差异。对于需补充稳定凝血因子和血浆蛋白的疾病不能达到治疗目的,冷上清的临床使用价值有限。但在TTP治疗上有较明显的应用价值,血站和临床应用单位可以考虑把去冷沉淀血浆作为一种成分血进行制备和使用,为血栓性微血管疾病及相关患者的治疗提供了一种新的手段。

参　考　文　献

1　高峰,主编.输血与输血技术[M].第1版.北京:人民卫

生出版社,2003:130.

2　李家增,王鸿利,王兆钺,等.主编.血栓与出血的诊断及

治疗[M].上海:上海科技教育出版社,2003:235.3　马红丽,孔先玲,刘红冰.一种新的成分血—冷上清的开

发和应用[J].医学研究杂志,2009,38(12):96-97.

(收稿日期:2010-12-01)(本文编辑:蒋光明)

[3]

[2]