酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

RAND&STANDARDIZATION

品牌与标准化2019年第1期

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的

不确定度评定

孟祥文

（阜新市检验检测认证中心，辽宁阜新123000）

【摘要】本文依据JJG861-2007《酶标分析仪》检定规程和JJF1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》，分析了可能影响酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的各不确定度分量的主要来源，给出了不确定度的评定过程。

【关键词】酶标分析仪；吸光度；不确定度【DOI编码】10.3969/j.issn.1674-4977.2019.01.007

UncertaintyEvaluationinAbsorbanceMeasurementResultoftheELISAAnalyticalInstruments

MENGXiang-wen

（FuxinTestingInspectionandCertificationCenter，Fuxin123000，China）

Abstract：AccordingtotheverificationregulationofJJG861-2007ELISAAnalyticalInstrumentsandJJF1059.1-2012EvaluationandExpressionofUncertaintyinMeasurement，themainsourcesofuncertaintywhichmayaffecttheabsorbancemeasurementresultoftheELISAanalyticaliInstrumentswereanalyzed，andtheevaluationprocessofuncertaintywasgiveninthispaper.

Keywords：ELISAanalyticalinstruments；absorbance；uncertainty

1测量过程

在酶标分析仪检定规程规定条件下，仪器开机预

光片平放在微孔酶标板的空板架上，以空气为参比，连续测量3次，得到吸光度示值平均值，该平均值与相应波长下的吸光度标准值之差，即为吸光度的示值误差。

热后，依次设置仪器波长为405nm、450nm、492nm、620nm，然后将吸光度标称值为1.0A的光谱中性滤

【作者简介】孟祥文（1987-），女，工程师，硕士，研究方向为计量检定。

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孟祥文：酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定鉴定与检测

2数学模型

ΔA=A

ˉ-As式中：ΔA——吸光度示值误差；

A

ˉ——酶标分析仪吸光度3次测量值的算术平均值；

As——光谱中性滤光片吸光度标准值。

3

各输入量的标准不确定度评定

3.1

输入量A

ˉ的标准不确定度u(Aˉ)评定输入量A

ˉ的不确定度主要来源于酶标分析仪的示值不稳定性，可以在重复性试验条件下，通过连续测量获得，采用A类方法评定。也可以根据检定规程中规定的示值稳定性要求，采用B类方法评定。现在分别用上述两种方法进行不确定度分析。

1）以上海科华实验系统有限公司生产的型号为ST-360的酶标分析仪为例，设置仪器波长为492nm，选择吸光度标称值1.0A的光谱中性滤光片，连续测量3次，得到数据如下：1.033、1.031、1.032，采用极差法计算实验标准差。测量次数n=3时，极差系数C为1.69，计算实验标准差为：

s(A

ˉ1)=AmaxC-Amin=1.0331.69-1.031=0.0013A另外任意选择3台相同类型的酶标分析仪，每台分别在波长405nm、450nm、492nm、620nm条件下，测定吸光度标称值为1.0A的光谱中性滤光片，连续测定3次，共得到12组测量列，每组测量列分别按上述方法计算单次实验标准差，所得结果见表1。

表1

12组实验标准差

实验标准差SS1S2S3S4S5S6j测量值0.00180.00070.00240.00130.00000.0024实验标准差SS7S8S9S10S11S12j测量值0.00070.00180.00370.00300.00130.0024合并样本标准偏差为：

m2

Sp=

∑S

j=1

j

m=0.0021A

实际测量时是在重复性条件下，连续测量3次，以3次测得的算术平均值为测量结果，则测量重复性引入的标准不确定度分量为：

u(A

ˉ1)=Sp3=0.00213=0.0013A自由度为：

v=(n-1)×m=(3-1)×12=24

2）JJG861-2007《酶标分析仪》检定规程中所规定的示值稳定性应不大于±0.005A，假设在该范围内均匀分布，则由示值稳定性引入的标准不确定度为：

u(A

ˉ2)=Sp3=0.005=0.0029A由分析结果可知u(Aˉ3ˉ2)>u(Aˉ1)，所以选择u(A

ˉ2)作为输入量A的标准不确定度，即：

u(A

ˉ)=u(Aˉ2)=0.0029A3.2输入量As的标准不确定度u(As)评定

输入量As的标准不确定度主要由光谱中性滤

光片的定值不确定度及其年变化量所引入，属于B类标准不确定度。

3.2.1光谱中性滤光片的定值不确定度u(As1)

根据光谱中性滤光片校准证书给出的吸光度定值的扩展不确定度为0.011A，包含因子k=2，则标准不确定度为：

u(As1)=

0.0113.2.2光谱中性滤光片的年变化量2=0.0055A引入的不确定度u(As2)

根据相关资料，光谱中性滤光片的年变化量为

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品牌与标准化2019年第1期

0.004A，取均匀分布，则标准不确定度为：

u(As2)=

0.004=0.0023A36测量不确定度报告

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的扩展不

确定度为：

U=0.0200A，k=2

3.2.3输入量As的标准不确定度u(As)

由于以上二项分量相互独立不相关，将其合成，得到输入量As的标准不确定度为：

u(As)=

u2(As1)+u2(As2)=0.0060A

7结语

综上所述，在酶标分析仪吸光度示值误差检定

4合成标准不确定度

ˉ与输入量As相互独立不相关，输入量A故合成标

时，其测量结果的不确定度主要来源于仪器示值稳定性、标准器定值不确定度以及标准器年变化量，其中标准器定值不确定度的影响最大。

准不确定度为：

uc=

ˉ)+u2(As)=0.0067A≈0.0070Au2(A

[1][2][3]

【参考文献】

测量不确定度评定与表示：JJF1059.1-2012[S].倪育才.实用测量不确定度评定（第5版）[M].北京：中国质检出版社，2016.

董艳华.酶标分析仪示值误差测量结果的不确定度评定[J].计量与测试技术，2012（1）：40+43.

5扩展不确定度

取包含因子k=2，则扩展不确定度为：

U=2×0.0070=0.0140A≈0.0200A

（上接第45页）

过接受限，同时测量不确定度不超过附录A中的最大允许测量不确定度。接受限的定义更符合IEC6167-1：2013中对合格判据的描述。

[1]

声级计检定规程：JJG188-2017[S].声级计型式评价大纲：JJF1681-2017[S].

张多利，刘金玲.JJG188-2017声级计检定规程变化分析[J].计量与测试技术，2018（9）：103-104.

【参考文献】

11结语

通过对声级计检定规程修订的主要内容进行了

[2][3]

详细阐述，并分析了新规程周期检定声级计过程中可能遇到的实际问题和注意事项，进而顺利完成新规程的变更确认工作，对以后声级计的检定工作具有指导参考意义。

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