《现代食品科技》Ｍｏｄｅ朋Ｆｏｏｄｓｃｊｅｎｃｅ蛐ｄＴｅｃｂｎｏ－ｏｇｙｖｏＪ．２２Ｎｏ．４（簋９０）文章篇号：１００７—２７６４（２００６）０４—００８２—０２５苹果多酚氧化酶的提取及其抑制作用的研究刘文山，肖凯军，郭祀远（华南理工大学食品学院，广东广州５１０６４０）摘要：以冷冻丙酮制备苹果多酚氧化酶（ＰＰｏ），通过以邻苯二酚为底物测定氧化产物的方法，对苹果果肉中多酚氧化酶的ｐＨ值、温度、热稳定性及抗氧化剂抑制作用进行了研究。结果表明：用真空冷冻干燥得到的酶粉能更好的保持多酚氧化酶活性；酶氧化邻苯二酚的最适ｐＨ为６．ｏ，最适温度为２５℃；ＰＰ０在２０－２５℃时对热较稳定，期后随着温度升高后，醇活迅速降低；在Ｊ００℃维持１ｍｊｎ酶全部失活；抗坏血酸和黄酮类物质能明显地抑制酶促褐变。关键词：苹果多酚氧化酶；酶促褐变；抑制；抗坏血酸：黄酮ＴｈｅＥｘｔｒａｃｔｉｏｎａｎｄＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＡｐｐｌｅＰＯＩｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅＬｉｕＷｅｎ—ｓｈａｎ，ＸｉａｏＫａｉ－ｉｕｎ，ＧｕｏＳｉ－ｙｕａｎ（ｃｏｌｌｅｇｅｏｆＬｉｇｈｔＣｈｅｍｉｓⅡｙ锄ｄＦｏｏｄｓｃｊｃｌｌｃｅ，ｓｏｕｔｈｃｈｉｎａｕｎｉｖｅｒＳ时ｏｆＴｅｃＩｌｎｏｌｏｇｙ’（沁ａｎｇｚｈｏｕ５１０６４１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓ岫ｃｔ：Ａｐｐｌｅｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ（ＰＰＯ）ｗ踮ｅｘｎ涨ｄｗｉ仇ｃｏｌｄａｃｅｔｏｎｅａ１１ｄ廿ｅ删ｗｉｌｌｌ舳鲥ｎｇｄｒｙ．Ｔｈｅｃｈａ伯ｃＩｅｎ毗ｉｃｓｏｆＰＰＯｗｃｒｅｉｎｖｅ吼ｉｇａｔｅｄｂｙｗａｓｂｅｔｔｃｒｔｏｗａｓｓｆａｂｌｅｉｎｄｅ咖ｉｎｉｎｇｏｘｉｄａｌｉｖｅｐｒｏｄｕｃｔｕｓｉｎｇｃ种亭ｃｈｏｌ如ｓｕｂｓ廿ａｔｅＴｈｅ糟ｓｕｈｓｈｏｗｅｄ伽ａｔｖａｃｕｕｍ丘℃ｅｚｅｄｒｙｉｎｇｆｏｒｅｎ纠ｍｅｐｍｐ蛳ｔｉｏｎｓ，恤ｋｅ印ｔ１１ｅ拟ｉｖ时ｏｆＰＰｏ．Ｔｈｅｏｐｔｉｍａｌ瑚ｃＩｉｖｃｔｅｍｐ咖ｒｃｔ｝ｌｅｒａｎｇｅｏｆｆ如Ｈ１２０℃ｔｏ２５℃ＦⅢｔｈｅｒｉｎｃ陀踮ｅｉｎａｎｄｐＨｖａＩｍｏｆＰＰ０ｗｅｒｅ２５℃如ｄ５．０．Ｉｔｗ船ａｌｓｏｆｏｕｎｄｔｈａｔＰＰＯ１００℃ｆｏｒ６０ｔ锄ｐｅｒａ咖’ｈｏｗｅｖ％ｄｅｃｒ髓ｓｅｄ｝ｔｓａｃｔｉｖｉ啦Ｈｅ删ａｔｃａｎａ吐ｊｖｉｔｙｏｆＰＰｏｗａｓａｌｍｏ甜ｌｏ砒Ａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄａ１１ｄｎａｖｏｎｅｃｏｕｌｄｓｉｇｌｌｉｎｃａｌｌｔｌｙｉｎｈｉｂｉｔｔｈｅｂｒｏｗｎｉｎｇｒｃａｃｔｉｏｎｃａ协ｌｙ髓ｄｂｙｔｈｅｅｎｚｙｍａｔｉｃＰＰＯ．ｎｅａｃｔｉｖｉｔｙｄｅｃｒｃａｓｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｅｏｆｓｔｏｒａｇｃｔｉｍｅａｔ２５℃ａｎｄ４℃，ａＴｌｄｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｋｅｅｐｈ蟾ｈｅｒａＩｒｃＩａｔｉｖｅｌｙＩｏｗｅｒｔｅｍｐｅｒａＩｕｒｅＫｅｙｗｏｒｄｓ：ＡｐｐｌｅｐｏＩｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅ；Ｅ“纠ｍａｔｉｃｂｒ０、Ⅵｌｉｎｇ；Ａｓｃｏｒｂｉｃａｃｉｄ；Ｆｌａｖｏｎｅ与其他果蔬相比，苹果在加』＝中的酶促褐变尤为严重，多酚氧化酶（ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ“ｉｄａｓｅ，简称ＰＰ０）参与苹粜的酶促褐变早已得到证实，人们一直在寻找合适的、能用于抑制苹果多酚氧化酶的活性的防褐变剂，以此来生产出高质量的浑浊苹果汁。业硫酸盐是有效１材料与方法１．１材料选用优质红富士苹果１．２仪器的防褐变剂，但它会造成硫的残余而影响人们的健康，美国ＦＤＡ已于１９８６年限制了它在果蔬中的使用。抗坏ＡＬＰＨＡ２．４真空冷冻丁燥机：博砺行仪器有限公司：尤尼柯紫外ｕｒ见分光光度计ｕｖ．２１０２：尤尼柯上海仪器有限公ｒｄ；ＰＨｓ．３ｃ型酸度计：上海虹益仪器厂：家庭用果汁捣碎机；ＴＧｌ６．ｗＳ台式高速离心机：长沙湘仪离心机仪器有限公司。１．３方法１．３．１血酸也是较早使用的防褐变剂，但它的抗褐变效果有浓度依赖性，添加量少效果较差，添加量过多会在果汁存放过程中因非酶促氧化降解而使果汁颜色变暗。据报道，黄酮具有抗氧化性Ⅲ，它用作苹果的的抗褐变剂几乎没有报道。本文对苹果多酚氧化酶特性加以研究，旨在考察可用于食品的防褐变剂黄酮对其的影响ＰＰＯ的提取苹果洗净后在４℃保温，再去皮后取果肉２００９，立及其与抗坏血酸防褐变能力的比较，为在苹果加ｒＴ过程中避免或减轻褐变的产生，生产品质上乘的产品提供一种途径。收稿日期：２∞Ｂ—０４＿２５广东省科技公关项目（编号２００４刚０２０１００１）、广州市科技成果推广项目（编号：２００６ｃ１３０∞”）作者简介：刘文山．在读硕士即加人冷冻丙酮（．２０℃）５００ｍｌ，用高速组织捣碎机匀浆２ｍｉｎ；用布氏漏斗抽滤，滤饼用２００ｍｌ冷冻丙酮再次提取抽滤，白色粉末冷冻真空干二燥，即得ＰＰｏ丙酮粉。称取丙酮粉Ｏ．５ｇ，溶于２５０ｍ１２０ｍｉｎ，５０００ｏ．０５ｍｏｌ／Ｌ．ｐＨ６．８的预冷（４℃）磷酸盐缓冲溶液，用磁力搅拌器搅拌ｒ／ｍｉｎ离心１０ｍｉｎ，上清液过滤，即得苹果ＰＰ０粗酶液。万方数据 《现代食品科技》Ｍｏｄｅ蛐Ｆ∞ｄｓｃｌｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙｖ０１．２２Ｎｏ．４（总９０）１．３．２多酚氧化酶测定方法在１ｍ１磷酸氧二钾一柠檬酸缓冲液中，用ｌｍｌ０．１ｍｏｌ几的邻苯二酚为底物，加１ｍｌ酶提取液，反应３ｍｉｎ后，在分光光度仪｝：扫描并观察３００．４５０ｎｍ波长范围内的吸收峰情况。测定时以水为空白，以热失活的粗酶液代替粗酶液在同样条件下测定为对照。１．３．３ＰＰＯ活性的测定取磷酸盐缓冲溶液１ｍ１于１ｃｍ比色皿中，加人Ｏ．１ｍｏｌ几邻苯二酚溶液１ｍｌ。混匀后在４００ｍｍ处比色，酶液加人后开始记时，每１５ｓ记录一次０Ｄ随时间的变化值，以最初直线段的斜率△ＯＤ／ｔ）表示酶活力，一一个酶活力单位（Ｕ）定义为：在测定条什Ｆ，每分钟引起吸光度改变０．００１所需的酶量。１．３．４ｐＨ对ＰＰＯ活性的影响配制Ｏ．２ｍｏｌ几柠檬酸缓冲溶液（ｐＨ３．５～５．６），０．２ｍ０１／Ｌ磷酸氢二钾缓冲溶液（ｐＨ５Ｏ～８Ｏ）。在ｌｃｍ比色皿中，加人试验所设定的缓冲溶液ｌｍｌ，Ｏ．１ｍｏｌ／Ｌ邻苯二酚溶液１ｍ１，ＰＰＯ粗酶液０．４ｍｌ，混匀，在室温下测定ＰＰＯ的活性。１．３．５温度对ＰＰＯ活性的影响在ｌｃｍ比色皿中，加人Ｏ．２ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ６．０）ｌｍｌ，０．１Ｍ邻苯二酚溶液１ｍ１，在某一温度（１０．５５℃）Ｆ保温５ｍｉｎ，加人相同温度下保温５ｍｉｎ，粗酶液１．６ｍｌ，迅速测定ＰＰＯ的活性。１．３．６ＰＰＯ的热稳定性ＰＰＯ粗酶液在１００℃水浴处理一定时间后立即置于水浴中，然后在反应体系ＤＨ６．Ｏ室温Ｆ测定ＰＰＯ的活性。１．３．７抑制剂对ＰＰＯ活性的影响用Ｏ．２ｍ０１／Ｌ磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ６．Ｏ），配制不同浓度的黄酮化合物和抗坏血酸抑制剂溶液，在反应体系口Ｈ６．Ｏ、室温下测定ＰＰＯ的活性。２结果与讨论２．１多酚氧化酶活性的表示苹果多酚氧化酶的催化氧化邻苯二酚的产物，在４００ｎｍ处有一最大吸收峰。多酚氧化酶的酶反应进程曲线（图１）测定表明，在测定时间为ｌｍｉｎ时，产物的生成速度和酶量具有较好的线性关系．所以本文除特殊说明外，用测定产物在１ｍｉｎ内４００ｍ处吸光值的变化来反映多酚氧化酶的活性。从图ｌ町以看出，苹果内的多酚氧化酶氧化邻苯二酚的反应和产物的初始生成速度较快，但多酚氧化酶很快就表现出失活，这足因为生成的醌使多酚氧化万 方数据酶受到抑制的结粜，前人［２。３１曾报道过这一现象。—－◆一０２ｍ１—－■一０４ｍ１－－１６ｒ—Ｏ６ｍ１Ｏ．３０２５Ｏ２０１５Ｏｌ００５０图１酶反应进程曲线２．２酶活测定所用缓冲溶液ｐＨ值的测定鉴于４ｉ同种类，甚全同种果蔬中的小例品种得到的ＰＰＯ具有不同的最适ＤＨ值口Ｊ，此外，报道的测定ＰＰＯ活力时所用的ＤＨ值有４．５、５．０、６．Ｏ和６．５【４０“，故有必要探讨富士苹果ＰＰＯ的酶活测定所用缓冲液的ＤＨ值。苹果多酚氧化酶对ｐＨ的变化相当敏感。如图２，当ｐＨ值在６．Ｏ附近时，表现最高活力，当ｐＨ升到８．０时，其活力只有最高活力的１９％；当ｐＨ降到３．５附近时，其活力仅为最高活力的２５％；ｐＨ值越低，酶活下降越甚。啪㈣呲嘶叭㈣。图２酶活与缓冲液ｐＨ值的关系２＿３温度对ＰＰＯ活性的影响采用调节温度来控制酶催化反应速度是非常重要的。一方面，在低温下保藏食品能减少酶对软化、１ｉ良风味的产生和成熟等的影响；另一方面，在食品加工中采用高温处理能破坏或钝化所有的酶活力。此外，在酶测定中准确地控制温度是得到可靠重复数据的先决条件”。。温度对多酚氧化酶的影响是双重的，一方面温度升高能加快酶催化反应速度进程，另’方而促使酶蛋白变性，是２种对抗效应综合反应。图３为粗酶液在不同温度下处理５ｍｉｎ后的效果图，由图可知，苹果中ＰＰＯ的最适温度为２５℃。当温度降至ｌＯ℃，酶活性为最高活性的７７％：当温度升至５５℃，酶活力性为最高活性的５９．６％；因此，调节温度条件能有效抑制酶的《现代食品科技》ＭｏｄｅｒｎＦｏｏｄｓｄｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈｎｏｌｏ盱ｖ０１．２２Ｎｏ．４（息如）活性。５ｌＯ１５２０２５３０３５４０４５５０５５图３不同温度对ＰＰ０活性的影响１２０１００８０６０４０２００图４热处理时间对ＰＰ０相对活性的影响由图４可知，苹果多酚氧化酶在１００℃下仅处理１０ｓ，酶仍保留大部分活性；而且，当处理４０ｓ时，酶才基本失活，直至６０ｓ时才完全失活。可见苹果内的多酚氧化酶的热稳定性显然不同于类似于漆酶的荔枝果皮多酚氧化酶ｐＪ，荔枝果皮的多酚氧化酶经煮沸５ｍｉｎ后仍能保持其部分活性。２．４抑制剂对酶活的影响∞＋３ｐｐｍ＋７ｐｐｍ—扣１３ｐｐｍ幡屺！耋¨！耋。图５抗坏血酸对酶活的影响如图５，抗坏血酸对多酚氧化酶催化氧化酚类化合物的变褐反应表现出明显的抑制作用，并且这种抑制作用随着抗坏血酸浓度的提高而加强。但是，在一定浓度下（３３ｐｐｍ），它对多酚氧化酶的抑制只能维持一定时间，当反应体系中抗坏血酸被全部氧化后，酶促反应速度随即叉恢复正常水平；而在浓度高于３３０ｐｐｍ万 方数据时，于２４ｈ内，则没有发现多酚氧化酶被抑制后又恢复活性的现象。Ｋｍｅｇｅ一”曾报道抗坏血酸能促进多酚氧化酶的活性，但却能阻止其接触氧化邻苯二酚时的变褐作用，因为抗坏血酸在多酚氧化酶接触氧化邻苯二酚的反应系统中，能防止邻苯醒的进一步氧化，瞬时地将邻苯醒还原为邻苯二酚。０．１６０１４０．１２０１００８００６００４００２００ｌ２３４Ｓ６７８９１０图６黄酮对酶活的影响如图６所示，当黄酮类化合物的浓度高于６６ｐｐｍ时，它能很好地抑制多酚氧化酶的活性，可见黄酮类化合物是一类较好的抗氧化活性的物质，这是由于黄酮类化合物中含有酚羟基，能与金属发生螯合，也能清除活性氧，终止自由基连锁反应，阻止单线态氧（１Ｏ２）的形成【１ｑ。因此，板栗壳色素具有抗氧化性＇｛艮可能是其中含有黄酮类物质的结果。３小结（１）多酚氧化酶的最适ｐＨ值为６．Ｏ，在ｐＨ值５．５－６．０范围内酶活力最大；其他ｐＨ值下均表现出不同程度的抑制，因此可通过调节口Ｈ值来控制苹果褐变的程度。（２）多酚氧化酶对热敏感，其最适温度为２５℃，１００℃处理１ｍｉｎ酶基本全部钝化。（３）黄酮与抗坏血酸防止酶促褐变有明显作用，防褐变力相当。参考文献［１］孔琪．菊花黄酮的提取及抗氧化活性研究川．中草药，２００４．３５（９）：１００ｌ－１００２．【２】Ａ１丘喇ＭＭ，ＨａｒｅｌＥ．Ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄ嬲ｅｉｎｐＩ卸协．Ｐｈｙｔｏ－ｃｈｅｍｉｓ时，１９７９，１８（２）：１９３—２１５【３】王璋食品酶学【Ｍ】．北京：中国轻工业出版社，１９９Ｉ：２６３．【４】ＢＫＴ孤＇ＮＤＨａｌＴｉｓ．Ｍａｉｌｌａｒｄ嘲嘶ｏｎｐｍｄｕ出ｉｎｈｉｂｉｔａｐｐｌｅｐｏｂ讪ｅｎｏｌｏｘｉｄ硒ｅ．Ｆ００ｄｃｈｅｍｉｓｔｒｙ【Ｊ】，１９９５，５３：２６７［５】于佳富士苹果多酚氧化酶特性研究［ＪＪ中围野牛植物资源，１９９８，１８（４）：１３－１６（下转第１５５页）《现代食品科技》ＭｏｄｅｍＦ∞ｄｓｃｉｅｎｃｅａｎｄＴｅｃｈ∞ｌｏ科ｖ０１．２２Ｎｏ．４（总９０）２１３氨基酸分析氨基酸（ＡＡ）是组成蛋白质的基本单元，蛋白质经酸、碱或蛋白酶水解后生成游离氨基酸．随着现代科学的发展，氨基酸的重要性日益突出，用途也愈来愈广泛的被了解。如赖氨酸可改善营养不良、蛋白质代谢障碍等症状、促进生长发育、促进食欲、增补营养、增进年老弱者的身体健康，并具有促进病后机体恢复等特殊功效；甘氨酸对细菌有专一的抑制作用；天冬氨酸具有抗疲劳作用；Ｌ罐ｌ氨酸可治疗胃和十＝指肠溃疡及肝炎等；Ｌ．精氨酸用于治疗肝昏迷等症；谷氨酸有益于肝脏、消化系统和脑神经代谢ⅢＪ。取一定量样品，加入适量６ｍｏｌｎＨｃｌ，封口，置】１０℃恒温箱中水解２４ｈ，用氨基酸自动分析仪测定，检出１５种氨基酸，其中含有７种人体必需氨基酸，结果见表６。表６鹿胎衣蛋白中氪基酸的组成单位：ｍｇ／ｇ名称含量３３．５９６０００１３．２６１８．８４４５．５８３８．４６３．２营养成分测定结果为：蛋白含量７７％，脂肪含量７．８％，糖含量３．４％。３．３本实验提取分离的鹿胎衣蛋白质，经ｓＤｓ．聚丙烯酰胺凝胶电泳法初步证实了鹿胎衣水溶蛋白是由５种分子量分别在１４ＫＤ．３２ＫＤ之间的蛋白质组成的混合物。３．４氨基酸分析表明，鹿胎衣蛋白质含有Ｊ５种枪出氨基酸，其中含有７种人体必需氨基酸。３．５鹿胎衣是迄今为止尚未被利用起来的高蛋白物质，因此，充分利用现代生物技术，开发研究鹿胎衣产品具有良好的经济价值，本实验将为下一步鹿胎衣蛋白的提纯及其活性研究奠定基础。参考文献…倪佳奎．药用鹿产品的临床戍用与概述吉林中医药，１９８６，（３）：３３—３４名称赖氨酸（Ｌｙｓ）胱氧酸（ｃｙｓ）缬氨酸（ｖａｌ）蛋氧酸（Ｍｅｔ）苯丙氨酸（Ｐｈｃ）异亮氨酸（¨ｅ）含量１８．６７２２．８８２１４４１４．７４３８８１１７［２】隽兆东，管英俊，郭继忐．对羊膜认识过程的哲学启示．医学与哲学，１９９９，２０（３）：５３．５４天冬氨酸（Ａｓｐ）谷氨酸（Ｇｌｕ）『３１周爱儒，杏锡良．生物化学第６版．北京：人比ｌＪ生出版社，２００４：１６０．丝氨自受（ｓｅｒ）组氨酸（Ｈｉｓ）甘氨酸（Ｇｌｙ）［４】ＲＶＭｍＩｉｄＩｌ耵．ＴＰ舯ｄａ．ｖａｌ∽ｂａｓｅｄｐｍｄｕｃ拓劬ｍＥｎｉｎ睇ｒｍｇ．２０００，２２：１４５・１４８ｈｕｍ如苏氨酸（ｍ）精氨舀曼（Ａｒ曲丙氨酸ｆＡｌａ）１９ｐｌａｃ咖Ｂｉ叩ｍｃｅｓｓ［５】ＭｉｃｈｅＩＤ．ｅｔ３０．８８竞氯舀垒（Ｌｅｕ）１１．５８３．７８９ａ１．ｃｏｌ州ｍｅ埘ｃｍ抽０ｄｆｏｒｄｅＩｅｎｌｌｉｎａｔｉｏｎｏｆｓｕ哪ａｎｄｒｅｌａｔｅｄｓｕｂ咖ｎｃｅ．Ａｎａｌ．Ｃｈｅｍ．，１９５６２８：３５０＿３５７［６】Ｌａ∞ｍＬｉｕＡｓｓｅｍｂｌｙＫ．ＣｌｅａｖａｇｅｏｆｏｆＨｅａｄ３结论Ｓｔｎｌ咖ｍｌＰｒｏｔｅｉｎｓｄｕｄｎｇｔ１１ｅＮａＩｕｒｅｏｆＢａｃｔｅ—ｏｐｈａｇｅＴ４３．１本实验以新鲜鹿胎衣为原料，经过初处理，采用（ＮＨ４）２Ｓ０４盐析沉淀法提取水溶性蛋白，并通过正『７１（Ｌａｎｄｏｎ），１９７０，２２７：６８０一６８５滕利荣生物学基础实验教程．长春：吉林科学技术ｍ版礼，１９９９：５０３－５０５交实验确定了蛋白质提取分离的优化条件：盐析时间为１２ｈ、盐析ｐＨ值为７、（ＮＨ４）２Ｓ０４饱和度为６０％。（上接第８４页）［８］村上元孝．老年病学．人民卫生出版社．１９８ｌ：６７—６９［１１］ＥＰａｌｏｕ，Ａ【Ｄｐｅｚ－Ｍａｌｏ，ＧＶＢａｒｂｏｓａ－ｃ柚ｏｖａｓ，ｅｔａｌａｃｔｉｖｉｔｙ同ＥＰａｌｏＩｌ＇ＡＩ掣ｚ．Ｍａｌｏ，ｅ【ａ１．ＰｏＩｙｐｈｅｎ０１０ｘｉｄａｓｅａｃｔｉｖｉｃｙｐｒｅｓｓｕｒｅ彻Ｉｅｄｊ∞ｄｉａｔｉ呻０ｎｔｏｓｋｉｎＦ００ｄＰｏＩｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅｈｙｄｍｓ诅ｔｉｏａｎｄｃｏｌｏｒｏｆｂＩ∞ｃｈｅｄａｎｄａｎｄｃｏｌｏｒｏｆｂｌａｎｃｈｅｄａｎｄｈｙｄｒｏｓ诅ｔｉｃｐｒｅｓｓｕｒｅ们砷：ｄＥ脯ｃｔｂ锄ａＴｌａｐｕｒｅｅ［刀．ＪＦ００ｄｂ∞ｍａｐｕｆ∞阴．Ｊ［７】ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，６４（１）：４２—４５Ｓｃｉｅｎｃｅ，１９９９，６４（１）：４２＿４５．ｎｏｍ船Ｐ，Ｎａ打ＰＭｐｏｌｙｐｈ舶ｏｌｉｎＥ敝ｔｏｆｇａｍｍａ［１２］Ｔｈｏｍ髂只ＮａｉｒＰＭｏｆｇ帅ｍａｉ珊ｄｉａｔｉｏｎｔ０ｏｎｏｘｉｄａ∞删ｖ时锄ｄｉｔｓｒｅｌａＩｉｏｎｂｒｏｗｉｎｇｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｏｘｉｄａｓｅａｃｔｉｖ姆锄ｄ弛ｒｃｌａｔｉｏｎｓｋｉｎｂｒｏｗｉｎｇｂ蛐锄ａ．Ｐｈ”０ｃｈｅｍｉｓ仃ｙ，１９７１，ｌ０（３）：７７ｌ－７７７［１３］ｉｎｂ锄ａ１１ａ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔ阱１９７ｌ，１０（３）：７７ｌ一７７７．李明启，严君灵荔枝果皮多酚氧化酶的研究叨．植物学报，１９６３，１１（４）：３２９．３３６【８】孛明启，严君灵．荔枝果皮多酚氧化酶的研究【Ｊ】植物学报，１９６３，１１（４）：３２９．３３６．【９】Ｉ（ｎｌｅｇｅｒＲｃ．Ｔｈｅｍｌｅｏｆｒｅｄｕｃｉｔｌｇａｇｅ岫ｉｎ岫ａｃｔｉｏｎｏｆ［１４］ＫｒｕｅｇｅｒＲｃ．ｎＩｅｒｏｌｅｏｆｒｃｄｕｃｉｎｇａｇｅ心ｉｎｔｈｅａｃｔｉｏｎｏｆｌｙｒｏｓｉｎ鹪ｅ．ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍＢｉ叩ｈｙｓｉｏ＇１９５８，７６（１）：８７－９６ｂ∞ｓｉｎ强ｅ．ＡｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍＢｉ叩ｈｙｓｉｏ，１９５８，７６（１）：８７—９６．［１５］汪秋安．天然黄酮类化合物的牛理功能及儿应用［Ｊ］香料香精化妆品，１９９９（１）：２８０３．【１０】汪秋安．天然黄酮类化合物的生理功能及其应用【Ｊ】．乔料香精化妆品，１９９９（１）：２８．３３．万方数据
