胭脂鱼仔鱼的生长和消化酶活力变化

第４０卷　第６期　Ｖｏ１．４０　Ｎｏ．６　淡水渔业　２０１０年１１月　Ｎｏｖ．２０１０　Ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ　Ｆｉｓｈｅｒｉｅｓ　胭脂鱼仔鱼的生　长和消　化酶活力变化　郑凯迪　，陈桂来　，孙　彬　，王祥川　，许莉佳　，李　云　（１．西南大学生命科学学院，教育部淡水鱼类资源与生殖发育重点实验室；　２．西南大学动物科技学院，重庆４００７１５）　摘要：对胭脂鱼（Ｍｙｘｏｃｙｐｒｉｎｕｓ　ａｓｉａｔｉｃｕｓ）孵化后１～３７　ｄ仔鱼的体长、体重、ＲＮＡ／ＤＮＡ比率、胰蛋白酶、脂肪酶　和淀粉酶的酶活力变化进行了测定。结果显示：胭脂鱼仔鱼ｌ～３７　ｄ体长稳定增长。体重增加呈阶段性，在ｌ～　２１　ｄ体重增长缓慢，２１～２９　ｄ体重增加较快，２９～３７　ｄ体重快速增加。仔鱼从７　ｄ开始摄食，１～６　ｄ，ＲＮＡ／ＤＮＡ　比率变化很小，蛋白含量逐渐降低；７～２１　ｄ，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率波动较大，蛋白含量增长缓慢；２１～３７　ｄ，ＲＮＡ／　ＤＮＡ比率和蛋白质均增长迅速。生长率（ＧＲ）与ＲＮＡ／ＤＮＡ比率的回归方程为：ＧＲ＝１．０１ＲＮＡ／ＤＮＡ＋１．６０７７（Ｒ　＝０．８５１６）。从２、５和７　ｄ开始分别检测到明显的胰蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活力，之后，消化酶活力随着发育　先快速地上升然后波动性地下降到一个稳定水平。结果表明：胴脂鱼仔鱼从内源性到外源性营养转化过程中，　不同的消化酶能够检测到明显酶活力的时间不同，到仔鱼开始摄食时已经具备消化蛋白质、脂肪和淀粉的能力；　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率可以作为判定仔鱼生长率的可靠指标。　关键词：胭脂鱼（Ｍｙｘｏｃｙｐｒｉｎｕｓ　ａｓｉａｔｉｃｕｓ）；仔鱼；生长；ＲＮＡ／ＤＮＡ比率；消化酶活力　中图分类号：ｓ９４１．４２；Ｑ９３．３３１　文献标识码：Ａ　文章编号：１０００—６９０７一（２０１０）０６－０００９－０６　Ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ　ａｎｄ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｅｎｚｙｍｅｓ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ　ｌａｒｖａｅ（Ｍｙｘｏｃｙｐｒｉｎｕｓ　ａｓｉａｔｉｃｕｓ　Ｂｌｅｅｋｅｒ）　ＺＨＥＮＧ　Ｋａｉ．ｄｉ　，ＣＨＥＮ　Ｇｕｉ—ｌａｉ　，ＳＵＮ　Ｂｉｎ　，ＷＡＮＧ　Ｘｉａｎｇ—ｃｈｕａｎ　，ＸＵ　Ｌｉ－ｊｉａ　，ＬＩ　Ｙｕｎ　’　（１．Ｋｅｙ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ｏｆ　Ｆｒｅｓｈｗａｔｅｒ　Ｆｉｓｈ　Ｒｅｓｏｕｒｃｅｓ　ａｎｄ　Ｒｅｐｒｏｄｕｃｔｉｖｅ　Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ，　Ｍｉｎｉｓｔｒｙ　ｏｆ　Ｅｄｕｃａｔｉｏｎ，Ｓｃｈｏｏｌ　ｆ　ｏＳｃｉｅｎｃｅ；　２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｆ　ｏＡｎｉｍａｌ　Ｓｃｉｅｃｅｎ　ａｎｄ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓｏｕｔｈｗｅｓｔ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　４００７　１　５）　Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｂｅｔｔｅｒ　ｕｎｄｅｒｓｔａｎｄ　ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ　ｌａｒｖａｅ，ｂｏｄｙ　ｌｅｎｇｔｈ，ｂｏｄｙ　ｗｅｉｇｈｔ，ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｍ　，　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｖａｒｉａｔｉｏｎｓ　ｏｆ　ｔｒｙｐｓｉｎ，ｌｉｐａｓｅ　ａｎｄ　ａｍｙｌａｓｅ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｗｅｒｅ　ｍｅａｓｕｒｅｄ　ｄｕｒｉｎｇ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ　ｌａｒｖａｌ　ｄｅｖｅｌｏｐ—　ｍｅｎｔ（１～３７ｄ）．Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｈｏｗｅｄ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｂｏｄｙ　ｌｅｎｇｔｈ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ　ｌａｒｖａｅ　ｗｅｒｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｓｔａｂｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　１～３７　ｄ．　Ｗｅｉｇｈｔ　ｇａｉｎ　ｄｉｓｐｌａｙｅｄ　ａ　ｓｔｅｐ　ｉｎｃｒｅａｓｅｓ，ｉｔ　ｗａｓ　ｓｌｏｗ　ｄｕｒｉｎｇ　１～２１　ｄ，ｆａｓｔ　ｄｕｒｉｎｇ　２１～２９　ｄ，ａｎｄ　ｆａｓｔｅｒ　ｉｎ　２９～３７　ｄ．Ｔｈｅ　ｌａｒｖａｅ　ｓｔａｒｔ　ｉｎｉｔｉａｌ　ｆｅｅｄｉｎｇ　ｏｎ　ｔｈｅ　７　ｄ．ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ　ｃｈａｎｇｅｄ　ａ　ｌｉｔｔｌｅ　ｂｉｔ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｇｒａｄｕａｌｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　１　～６　ｄ；ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎｃｒｅａｓｅ　ｓｌｏｗｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　７～２　１　ｄ；ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｉｎ—　ｃｒｅａｓｅｄ　ｒａｐｉｄｌｙ　ｄｕｒｉｎｇ　２　１～３７　ｄ．Ｌｉｎｅａｒ　ｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ　ｅｑｕａｔｉｏｎ　ｏｆ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ（ＧＲ）ａｎｄ　ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ　ｉｓ　ＧＲ＝　１．Ｏｌ　ＲＮＡ／ＤＮＡ＋１．６０７７（Ｒ　＝０．８５１６）．Ｔｈｅ　ｅｎｚｙｍａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ｔｒｙｐｓｉｎ，ｌｉｐａｓｅ　ａｎｄ　ａｍｙｌａｓｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ　ｉｎ　２，５　ａｎｄ　７　ｄ　ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ｔｈｅｎ　ｓｈａｒｐｌｙ　ｒｏｓｅ　ａｎｄ　ｆｌｕｃｔｕａｔｅｄ　ｄｏｗｎ　ｔｏ　ａ　ｓｔａｂｌｅ　ｌｅｖｅｌ　ａｔ　ｌａｓｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ｓｕｇｇｅｓｔｅｄ　ｔｈａｔ　ｄｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｔｒａｎｓｉｔｉｏｎ　ｆｒｏｍ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ　ｔｏ　ｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓ　ｎｕｔｒｉｔｉｏｎ　ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ　ｌａｒｖａｅ，ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｅｎｚｙ—　ｍａｔｉｃ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎｉｔｉａｌｌｙ　ａｐｐｅａｒｅｄ　ａｔ　ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ　ｔｉｍｅ．Ｏｎ　ｔｈｅ　７　ｄ，ｌａｒｖａｅ　ｗｅｒｅ　ａｂｌｅ　ｔｏ　ｄｉｇｅｓｔ　ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ，ｌｉｐｉｄ　ａｎｄ　ｓｔａｒｃｈ　ｉｎ　ｄｉｅｔ．ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ　ｗａｓ　ａ　ｒｅｌｉａｂｌｅ　ｉｎｄｅｘ　ｔｏ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ　ｌｍｗａｅ．　Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ（Ｍｙｘｏｃｙｐｒｉｎｕｓ　ａｓｉａｔｉｃｕｓ）；ｌａｒｖａｅ；ｇｒｏｗｔｈ；ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ；ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｅｎｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　收稿日期：２０１０—０８—１２　资助项目：国家自然科学基金（３０６７０２６６）；国家重大科学研究计划（“９７３”）项目（２００９ＣＢ９４１２００）；教育部留学回国人员科研启动基金　（教外司２００６—３３１）；西南大学博士启动基金（２００５博０５）　第一作者简介：郑凯迪（１９８０一　），女，博士研究生，专业方向为鱼类生物化学与分子生物学。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚ　ｋｄ２００４＠１２６．ｃｏｉｎ　通讯作者：李云。Ｅ—ｍａｉｌ：ｙｕｎｌ￣ｌ＠ｙａｈｏｏ．ＣＯＢ．ａｎ　１Ｏ　淡水渔业　鱼类早期发育对其生长生存非常重要，仔鱼对　营养的消化、吸收、运输与成鱼不同¨　，它们对　ＧＲ＝１００　（１ｎ　２一Ｊｎ　１）／（ｔ２一ｔ１）　注：式中：Ｗ　为初始体重（ｇ），　为终体重　摄人食物的细胞外分解主要依靠胰腺分泌的消化酶　在肠中进行，消化酶的活力变化对仔鱼的营养代谢　起着重要的作用　。胭脂鱼（Ｍｙｘｏｃｙｐｒｉｎｕｓ　ａｓｉａｔｉｃｕｓ　Ｂｌｅｅｋｅｒ）属鲤形目，亚口鱼科，胭脂鱼属，是长江　上游特有鱼类，国家二级保护动物　，具有重要　的经济价值和学术价值一　Ｊ。关于胭脂鱼仔鱼早期　生长发育过程，研究者从开口饲料　’　，早期行　（ｇ），ｔ　表示初始天数（ｄ），ｔ　表示终止天数（ｄ）　１．４　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率、蛋白含量、消化酶活力测定　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率的测定参考Ｍａｔｈｅｒｓ等¨　的方　法，采用岛津ｕＶ一１７００分光光度计进行测定。　将保存于一８０℃的样品取出，分别按照试剂　盒要求测量蛋白含量和酶活力。蛋白含量采用考马　为　，胚胎发育　ｍ　等多方面进行过研究，但是关　于仔鱼生长规律和转食阶段消化酶的变化未见报　道。为了解胭脂鱼仔鱼早期生长发育规律和食性转　换过程中的生理变化，本研究对１～３７　ｄ的胭脂鱼　仔鱼的体长、体重和ＲＮＡ／ＤＮＡ比率进行了测定，　分析了仔鱼ＲＮＡ／ＤＮＡ比率和瞬时生长率之间的关　系，对胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶的酶活力进行了　测定，旨在为胭脂鱼的生物学研究提供基础资料，　也可为开发更有效的仔鱼饲料和优化胭脂鱼培育技　术提供参考。　１材料和方法　１．１实验鱼的饲养　胭脂鱼受精卯购自万州水产研究所，在５００　Ｌ　水族箱中孵化，水温（１８±１）℃，每天用等温水换　水两次。受精卵经过７　ｄ出膜。将出膜后仔鱼９００　尾，分为３个平行组，每组３００尾，养殖于２４０　Ｌ　水族箱中，水温控制在（２１．０±０．５）ｏＣ，２４　ｈ微充　气，每天上下午各用等温水换水１／３，吸污１次。　在孵化后７　ｄ，仔鱼开始投喂卤虫，每天２次，分　别为１０：００和１７：３０。光周期为１４　ｈ光照：１０　ｈ黑　暗。　１．２取样　胭脂鱼仔鱼１～１０　ｄ每天取样，从１１　ｄ开始隔　天取样，从２１　ｄ开始隔４天取样，直到３７　ｄ。每　次取样均在上午投喂之前。取样时从每个平行组中　各随机抽取１０尾，先按照１．３描述的方法测量体　长和体重，然后在液氮中速冻后储存于一８０℃备　用。　１．３体长体重测定和生长率计算　测量每隔４天所取每尾样品鱼的体长和湿重，　用体视显微镜（Ｎｉｋｏｎ，Ｃ—ＢＤ２３０）和测微尺测量样　品鱼体长，用ＦＡ－２００４Ａ电子天平（上海精天，感　量０．１　ｍｇ）测量样品鱼的湿重。生长率（ＧＲ）计算　采用以下公式：　斯亮兰蛋白测定试剂盒，胰蛋白酶活力采用胰蛋白　酶测定试剂盒，淀粉酶活力采用淀粉酶（ＡＭＳ）测　定试剂盒（碘一淀粉比色法），脂肪酶活力采用脂　肪酶测定试剂盒。所有蛋白质和酶活力试剂盒均购　自南京建成科技有限公司。　酶活力单位定义：胰蛋白酶活力单位定义，在　ｐＨ　８．０，３７　ｏＣ条件下，每毫克蛋白中含有的胰蛋　白酶每分钟使吸光度变化０．００３即为一个酶活力单　位（Ｕ）。淀粉酶活力单位定义，组织中每毫克蛋白　在３７　ｃＣｊ下与底物作用３０　ｒａｉｎ，水解１０　ｍｇ淀粉定　义为１个淀粉酶活力单位（Ｕ）。脂肪酶活力单位定　义，３７　ｃｃ条件下，每克组织蛋白与底物反应　１　ｍｉｎ，每消耗１　ｔｘｍｏｌ底物为１个酶活力单位（Ｕ）。　１．５数据分析　结果用ｍｅａｎ±ＳＤ表示，Ｄｕａｎ　Ｓ多重比对进行　显著性分析。作图使用ＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍ　５（ＧｒａｐｈＰａｄ　Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．ＵＳＡ）。　２结果　２．１胭脂鱼仔鱼的生长　胭脂鱼仔鱼的体长增长曲线见图１Ａ。在实验　期问胭脂鱼仔鱼体长增加总体趋势是平稳增加。胭　脂鱼仔鱼体重的增长大致可分为３个阶段（图１Ｂ）：　在１～２１　ｄ体重增长平缓，其中在１～１７ｄ，胭脂鱼　体重逐渐增加但没有达到显著水平（Ｐ＞０．０５），　２１　ｄ时达到（２８．２±２．４）ｍｇ；在２１～２９　ｄ与前一　阶段比较体重显著增加（Ｐ＜０．０５）；从第２９天开　始，体重快速增加，到３７　ｄ体重达到（９８．４±４．０）　ｍｇ。仔鱼在１～３７　ｄ之间，体长增加了２．７倍，体　重增加了１２．９倍。　２．２　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率　胭脂鱼仔鱼ＲＮＡ／ＤＮＡ比率随时间的变化如图　２，在１～６　ｄ，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率变化很小，在７　ｄ　时，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率突然增加，之后ＲＮＡ／ＤＮＡ比　率波动增加。从１９　ｄ开始，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率持续升　第６期　郑凯迪等：胭脂鱼仔鱼的生长和消化酶活力变化　讲　ｚ０２４　２Ｏ　一　三１６　１２　８　１　５　９　１３　１７　２１　２５　２９　３３　３７　出膜后天数（ｄ）　Ａ　１２０　１００　８０　１｝啊Ｉ　６Ｏ　僻　ｚ（Ｉ　ｚ　蛏　７　６　５　４　３４０　２０　Ｏ　图１　胭脂鱼仔鱼在实验期间的生长曲线　¨ｇ．１　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ（Ｍ．ａｓｉａｔｉｃｕｓ），ｌａｒｖａｌ　ｇｒｏｗｔｈ（１ｕｒｉｎｇ　ｔｈｅ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　Ａ．体长（Ｉ］ＩＩｌ１）曲线，Ｂ．体重（ｍｇ）曲线；小写字母表示显著性差　异（Ｐ＜０．０５）　８　７　６　５　４　３　２　ｌ　０　一　【】一埒半酬　１　５　９　１３　ｌ７　２ｌ　２５　２９　３３　３７　出膜后天数（ｄ）　图２胭脂鱼发育过程１～３７ｄ　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率变化　Ｆｉｇ．２　ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏｓ（ｍｅａｎ±ＳＤ）ｏｆ（　ａｓｉａｔｉｃｕｓ）　ｌａｒｖａｅ　ｄｕｒｉｎｇ　ｏｎｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　高，３７　ｄ时达到最高为（５．８８±０．１８），比１　ｄ时增　加了６．１６倍。　６　５　４　一　０　一　槲　９　＂袄Ｂ出　嗔　　２数　ｌ（　ｄ　凹　∞　１　Ｏ　出膜后天数（ｄ）　ｂ　图３　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率与生长率（ＧＲ）之间的关系　Ｆｉｇ．３　Ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ　ｂｅｔｗｅｅｎ　ｎｌｅａｎ　ＲＮＡ／ＤＮＡ　ｒａｔｉｏ　ａｎｄ　ｇｒｏｗｔｈ　ｒａｔｅ　ａ，线性关系；ｂ，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率、生长率（ＧＲ）与时间的关系　联合分析胭脂鱼仔鱼的生长率（ＧＲ）和ＲＮＡ／　ＤＮＡ比率，其线性关系如图３ａ所示，两者之间的　线性回归方程为：　ＧＲ＝１．０１ＲＮＡ／ＤＮＡ＋１．６０７７（Ｒ　＝０．８５１６）　随着胭脂鱼仔鱼的发育，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率和　ＧＲ的变化如图３ｂ所示，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率几乎呈直　线上升，而生长率呈波动曲线上升趋势。　２．３　仔鱼生长过程蛋白质含量和酶活力的变化　胭脂鱼仔鱼蛋白质含量随发育时间的变化如图　４ａ所示，在１～６　ｄ，蛋白质含量急剧降低，６　ｄ时　达到最低值。７　ｄ时，蛋白质含量迅速升高。在７　～１５　ｄ维持在约１．５　ｍｇ／ｍＬ，１５～２１　ｄ蛋白质含量　缓慢增加，２１　ｄ之后，蛋白质含量快速增加，３７　ｄ　时蛋白含量达到最高值。　在胭脂鱼早期发育过程中，胰蛋白酶活力的变　化如图４ｂ。在５　ｄ时即可检测到明显的胰蛋白酶活　力，为（９．１３±２．３１）Ｕ／ｍｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ，之后酶活力　逐渐增加。７　ｄ后，胰蛋白酶活力急剧增加，到１０　ｄ　时达到（６１．２３±３．７０）Ｕ／ｍｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ；之后，胰蛋　白酶活力随着仔鱼的发育逐渐波动降低，２９　ｄ后，　胰蛋白酶活力波动减小，逐渐趋于平稳，直到实验　结束。　３　　２　１２　淡水渔业　４　７０　．鲁６０　３　＆５０　ｂ０　４０　棚２　缸　魑　囊３皿　苗　０　黼１　皿２０　鳘ｌ０　Ｏ　Ｏ　ｌ　５　９　１３　１７　２１　２５　２９　３３　３７　ｌ　５　９　１３　１７　２１　２５　２９　３３　３７　出膜后天数（ｄ）　出膜后天数（ｄ）　ａ　ｂ　０．６　一　：１２５　．量　２　１００　盆　∞　吕　７５　一　・Ｒ　蝗　蜒５Ｏ　枯　溢　彝　鉴　磐２５　０　１　５　９　１３　１７　２ｌ　２５　２９　３３　３７　ｌ　５　９　ｌ３　ｌ７　２ｌ　２５　２９　３３　３７　出膜后天数（ｄ）　出膜后天数（ｄ）　Ｃ　ｄ　图４胭脂鱼发育过程中蛋白质含量和消化酶活力　Ｆｉｇ．４　Ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｃｏｎｔｅｎｔ，ｔｒｙｐｓｉｎ　ａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｍｙｌａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ａｎｄ　ｌｉｐａｓｅ　ａｃｔｉｖｉｔｙ　ｉｎ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　ｓｕｃｋｅｒ，　（Ｍ．ａｓｉａｔｉｃ￣）ｌａｒｖａｅ　ｄｕｒｉｎｇ　ｏｎｔｏｇｅｎｅｔｉｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａ．蛋白质含量（ｒａｇ／ｍＬ），ｂ．胰蛋白酶活力（Ｕ／ｍｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ），ｃ．淀粉酶活力（Ｕ／ｒａｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ），ｄ．脂肪酶活力（Ｕ／ｎａｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ）　淀粉酶活力的变化如冈４ｃ。在７ｄ的仔鱼中可　鱼仔鱼发育到出膜后第７天开始投喂，能在消化管　以检测到明显的淀粉酶活力，为（０．３０±０．０１）Ｕ／　中检测到卤虫的存在，其开口时间比张春光等　ｍｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ，之后淀粉酶活力迅速增加，到９ｄ时增　的报道提前，可能是因为本研究中养殖水温较高的　至（０．５７±０．０２）Ｕ／ｒａｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ，之后，淀粉酶活力　原因所致（后者的实验温度为１８．７　ｏＣ）。仔鱼开始　上下波动，实验结束时和７ｄ的淀粉酶活力近似。　摄食后其生理生化指标也随之开始发生了明显的变　脂肪酶活力的变化如图４ｄ。在２　ｄ的仔鱼中即　化，如ＲＮＡ／ＤＮＡ比率在１～６　ｄ之间时几乎没有　可以检测到明显的脂肪酶活力，为（２３．７８±２．２３）　变化，但从７　ｄ开始波动增加；蛋白质含量在孵化　Ｕ／ｍｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ，随后脂肪酶活力逐渐增加，从５　ｄ　后前６　ｄ逐渐下降至最低，而从７　ｄ开始明显上升。　开始，酶活力急剧增加，到１０　ｄ达到（１４０．３８±　在１～６　ｄ胭脂鱼仔鱼消化器官尚未发育完全，主　３．１３）Ｕ／ｒａｇ　ｐｒｏｔｅｉｎ；之后脂肪酶活力迅速降低，　要利用卵黄中的营养物质提供生长发育的能量，卵　在１７　ｄ出现回升，之后又迅速降低，从２５　ｄ开始　黄蛋白一直在消耗，所以总蛋白表现为逐渐降低的　脂肪酶活力趋于恒定。　趋势，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率没有明显变化，此时生长缓　＾　、｜．、＾　ｊ　、Ｊ　慢，但是开始投喂后（７　ｄ），仔鱼蛋白质含量开始　明显上升。这些指标的变化反映了胭脂鱼仔鱼营养　３．１胭脂鱼仔鱼营养转换过程和生长率的变化　方式的转换。据报道胭脂鱼孵化后的第７天，肝、　本研究中，在（２１．０±０．５０）ＣＣＩ条件下，胭脂　第６期　郑凯迪等：胭脂鱼仔鱼的生长和消化酶活力变化　胆、消化管已能很清晰地观察到　，此时仔鱼在　生理上可能已经具备了一定的消化外源营养物质的　能力。　一些研究表明ＲＮＡ／ＤＮＡ比率可以指示仔鱼和　无脊椎动物营养状况和生长率　”　，ＲＮＡ／ＤＮＡ比　率已经在一些鱼类¨　和无脊椎动物¨　中作为反映　幼体瞬时生长率的可靠指标。ＲＮＡ／ＤＮＡ比率和体　长及体重之间存在正相关¨　”Ｊ。在胭脂鱼仔鱼中，　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率与生长率（ＧＲ）之间也存在着正相　关，且相关系数较高，为０．８５１６；在ＲＮＡ／ＤＮＡ　比率和ＧＲ随时间的变化中可以看到，ＲＮＡ／ＤＮＡ　比率随着发育呈现出近似直线的上升趋势，在５～　３７　ｄ，除了１３　ｄ外，胭脂鱼仔鱼的ＧＲ都高于　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率，ＧＲ虽然呈曲线，但是也有波动　上升，两者在趋势上基本一致，所以胭脂鱼仔鱼的　ＲＮＡ／ＤＮＡ比率能够较真实地反映胭脂鱼仔鱼的瞬　时生长率。　从７　ｄ开始，仔鱼除了继续利用卵黄中的营养　物质外，开始摄取外源营养，处于从内源营养向外　源营养过渡的阶段，此时仔鱼的体重虽有增加但差　异并不显著（Ｐ＞０．０５），ＲＮＡ／ＤＮＡ比率增加的幅　度也较小，甚至还出现了上下波动，由于外源营养　的摄入使仔鱼的体内蛋白质含量增加，但同时卵黄　蛋白也在不断消耗，仔鱼体内的蛋白质处于一个身　体蛋白质合成和卵黄蛋白质消耗的动态变化中，因　此体内蛋白质含量增长缓慢。当卵黄吸收完后　（２１　ｄ），外源性营养物质成为仔鱼生长发育能量的　主要来源¨　，此时ＲＮＡ／ＤＮＡ比率迅速增加，体　内的蛋白质含量逐渐增加，仔鱼体重明显增加，生　长速度加快。　３．２　Ｉ１１１１１￣鱼仔鱼消化酶活力的变化　检测到明显消化酶活力的时间是选择仔鱼饵料　的重要参数＿ｌ　。本研究发现，在孵化２　ｄ后的胭　脂鱼仔鱼中就可以检测到明显的脂肪酶活力。Ｏｏｚ—　ｅｋｉ等　认为在仔鱼中存在２种脂肪酶，一种与卵　黄的吸收有关，能够水解卵黄中的脂质；另一种脂　肪酶是在发育后期才出现，与外源性的脂质消化有　关。本实验前期阶段所检测到的脂肪酶可能是水解　卯黄中脂质的酶，在初次投喂之前就已经存在，随　着卵黄的吸收，其活力逐渐降低。在孵化后第２１　天卵黄吸收完毕后，检测到的可能主要是第二种脂　肪酶，用于消化外源性脂质。　在孵化５　ｄ后的胭脂鱼仔鱼中可以检测到明显　的胰蛋白酶活力，表明在没有食物诱导的条件下，　胭脂鱼仔鱼也能够合成消化酶。初次投喂后，胰蛋　白酶活力显著增加。说明食物对胰蛋白酶的分泌有　刺激作用　¨。开始摄食后，消化酶活力主要受消　化器官发育的影响，也会对食物数量和组成做出反　应，受遗传和食物诱导的双重作用　。在刚刚开　口时，胭脂鱼仔鱼的消化器官还没有完全发育成　熟，捕食和消化能力均很弱，随着发育的进行，捕　食和消化能力都有很大的提高。所以消化酶活力表　现为随发育时间不断的增加　。在继续投喂后，　胰蛋白酶活力发生上下波动，这反映了仔鱼对饵料　的一个适应过程。在２９　ｄ后，胰蛋白酶活力逐渐　趋于稳定，相似现象也能够在欧洲海鲈　和黄花　鱼　中观察到。　淀粉酶活力在很多仔鱼的早期发育中都能检测　到如欧洲海鲈　、银头鲷　等。Ｐ６ｒｅｓ等　发现　淀粉酶活力表达模式受食物数量和质量调控，在不　同的鱼类中表达模式不同，与摄食习惯如食物组　成、食物数量和取样时间有关　。淀粉酶在早期　发育中的作用还不十分清楚，Ｃａｈｕ等　。。认为淀粉　酶活力的出现是肝胰脏成熟的标志。在胭脂鱼仔鱼　中，恰好在开始投喂时（７　ｄ）可以检测到明显的淀　粉酶活力，并且随着投喂时间的增加而增加，表明　胭脂鱼仔鱼的淀粉酶活力很可能是由食物诱导产生　的。在随后的发育过程中，淀粉酶活力出现上下波　动，但淀粉酶活力始终较低。这可能与饲喂的开口　饵料卤虫的淀粉含量较低（只有３．４％）［３１　有关，　也提示如果仔鱼缺乏某种营养物质，仔鱼体内消化　该物质的酶合成也会降低。　综上所述，本研究对孵化１—３７日的胭脂鱼仔　鱼的研究表明　胭脂鱼仔鱼早期发育过程中，孵化　后体长和体重增加迅速，ＲＮＡ／ＤＮＡ比率较可靠地　反映了仔鱼瞬时生长率，可以作为仔鱼的生长指　标。胭脂鱼仔鱼从内源性到外源性营养转化过程　中，不同消化酶可以明显检测到酶活力的时间不　同，胰蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶活力变化表现出先　显著增加然后逐渐下降并趋于稳定的变化规律。能　够检测到明显酶活力的时间和酶活力水平可能受到　发育的遗传程序控制和外源食物诱导的影响，胭脂　鱼仔鱼孵化７天后已经具备消化蛋白质、脂肪和淀　粉的能力　参考文献：　［１］Ｄａｂｒｏｗｓｋｉ　Ｋ．Ｔｈｅ　ｆｅｅｄｉｎｇ　ｏｆ　ｉｆｓｈ　ｌａｒｖａｅ：ｐｒｅｓｅｎｔ“ｓｔａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ａｒｔ”　ａｎｄ　ｐｅｒｓｐｅｃｔｉｖｅｓ［Ｊ］．Ｒｅｐｒｏｄ　Ｎｕｔｒ　Ｄｅｖ，１９８４，２４：８０７—８３３．　１４　［２］刘铭，胡先成，韩淡水渔业　２０１０正　强，等．河川沙塘鳢胚胎、仔鱼发育　［１９］Ｓｅｇｎｅｒ　Ｈ，Ｓｔｏｒｃｈ　Ｖ，Ｒｅｉｎｅｃｋｅ　Ｍ，ｅｔ　ａ１．Ｔｈｅ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ａｎｄ　ｍｅｔａｂｏｌｉｃ　ｏｒｇａｎｓ　ｉｎ　ｔｕｒｂｏｔ，Ｓｅｏｐｈｔｈａｌｍｕｓ　过程中蛋白酶活力的变化［Ｊ］．淡水渔业，２００８，（３８）５：３９—　４１．　ｕｌａｘｉｕｌｕｓ［Ｊ］．Ｍａｒ　Ｂｉｏｌ，１９９４，１１９（３）：４７１—４８６．　［２０］Ｏｏｚｅｋｉ　Ｙ，Ｂａｉｌｅｙ　ＫＭ．Ｏｎｔｏｇｅｎｅｔｉｃ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ｏｆ　ｄｉｇｅｓｔｉｖｅ　ｅｎ—　ｚｙｍｅ　ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｉｎ　ｌａｒｖａｌ　ｗａｌｌｅｙｅ　ｐｏｌｌｏｃｋ，Ｔｈｅｒａｇｒａ　ｃｈａｌｃｏｇｒａｍｍａ　［３］汪　松，乐佩琦，陈宜瑜．中圉濒危动物红皮书一一鱼类　［Ｍ］．北京：科学出版社，２００３，１—２５１．　［４］伍献文，杨ｆ荣，乐佩琦，等．中国经济动物志．淡水鱼类　（第二版）［Ｍ］．北京：科学出版社，１９７９，３２—３３．　［５］邓中舜，余志堂，赵　燕，等．三峡水利枢纽对长江白鲟和　胭脂鱼影响的评价及资源保护的研究．见：长江三峡工程对　生态与环境影响及其对策研究论文集［Ｃ］．北京：科学出版　［Ｊ］．Ｍａｒ　Ｂｉｏｌ，１９９５，１２２（２）：１７７—１８６．　［２１］Ｃｈｅｎ　Ｂ　Ｎ，Ｑｉｎ　Ｊ　Ｇ，Ｃａｒｒａｇｈｅｒ　Ｊ　Ｆ，ｅｔ　ａ１．Ｄｅｌｅｔｅｒｉｏｕｓ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｏｏｄ　ｒｆｅｓｔｒｉｃｔｉｏｎｓ　ｉｎ　ｙｅｌｌｏｗｔａｉｌ　ｋｉｎｇ？ｓｈ　Ｓｅｒｉｏｌａ　ｌｌａｎｄｉａ　ｄｕｒｉｎｇ　ｅａｒｌｙ　ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ［Ｊ］．Ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ，２００７，２７１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