２０１１年７月中 第３卷第２Ｏ期 Ｊｕｌｙ ２０１１ Ｖｂ１．３ ＮＯ．２０ 中国中医药咨讯 Ｊｏｕｍａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ・２３・ ＨＰＬＣ法测定参芪健胃颗粒中芍药苷的含量 王春丽 （河南省周口市食品药品检验所。河南周口。４６６０００） 【摘要】 目的：建立参芪健胃颗粒中芍药苷含量的ＨＰＬＣ测定方法。方法：采用ＳｈｉｍｐａｃｋＶＰ—ＯＤＳ Ｃ 。色谱柱，流动相为乙 腈－０．１％磷酸溶液（１４：８６），检测波长为２３０ｒａｎ，流速为０．８ｍＬ・删￣ｎ－１，柱温为３０￣（２。结果：芍药苷进样量在０．１６２６—１．０８４１ ｇ范围内与 峰面积呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９６）；平均回收率为９８．４５％，Ｐ，．ＳＤ为１．２８％（ｎ＝６ ｏ结论：该方法简便，可行、重现性好，可作为 参芪健胃颗粒的质量控制方法。 【关键词】ＨＰＬＣ法；参芪健胃颗粒；芍药苷；含量测定 Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ Ｐａｅｏｎｉｆｌｏｒｉｎ ｉｎ Ｓｈｅｎ ０ｉ Ｊｉａｎｗｅｉ ｐａｒｉｔｃｌｅｓ ｂｙ ＨＰＬＣ Ｗａｎｇ Ｃｈｕ￣ｉ （Ｚｈｏｕｋｏｕ ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｆｏｒ ｏｆｏｄ ａｎｄ ｄｒｕｇ ｃｏｎｔｒｏｌ，Ｈｃｎａｎ Ｐｒｏｖｉｎｃｅ，４６６０００） 【Ａｂｓｔｒａｃｔ】０ｂｊｅｃｔｉｖｅ Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ａ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｔｏ ｄｅｔｄｒｍｉｎｅ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ Ｐａｅｏｎｉｌｆｏｒｉｎ ｉｎ Ｓｈｅｎ Ｑｉ Ｊｉａｎｗｅｉ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ Ｓｈｉｍｐａｃｋ ＶＰ—ＯＤＳ Ｃｌ８ ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ｕｓｅｄ，Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ－０．１％ｐｈｏｓｐｈｏｒｉｃ ａｃｉｄ ｆ１４：８６１ ａｔ ａ ｌｏｗ ｒａｔｆｅ ｏｆ ０．８ｍＬ ｍｉｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ ｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ２３０ｎｍ．ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ ｗａｓ ３０℃．Ｒｅｓｕｌｔｓ Ｔｈｅ ｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎ ｃｕｒｖｅ ｏｆ Ｐａｅｏｎｉｎｏｒｉｎ ｗａｓ ｉｎ ａ ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｏｖｅｒ ｔｈｅ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０．１６２６～１．０８４１ ｇ（ｒ＝０．９９９６）． ｅ ａｖｅｒａｇｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ｗａｓ ９８．４５％．ｗｉｔｈ ＲＳＤ ｏｆ １．２８％（ｎ＝６）． Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ Ｔｈｅ ｍｅｔｈｏｄ ｉＳ ｓｉｍｐｌｅ，ｆｅａｓｉｂｌｅ ａｎｄ ｒｅｐｒｏｄｕｃｉｂｌｅ，ａｎｄ ｉｔ ｃａｎ ｂｅ ｕｓｅｄ ｏｆｒ ｔｈｅ ｑｕａｌｉｇ ｃｏｎｔｒｏｌ ｏｆ Ｓｈｅｎ Ｑｉ Ｊｉａｎｗｅｉ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ 【Ｋｅｙｗｏｒｄｓ】ＨＰＬＣ；Ｓｈｅｎ Ｑｉ Ｊｉａｎｗｅｉ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ；Ｐａｅｏｎｉｌｆｏｒｉｎ；Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ 参芪健胃颗粒由党参、当归、白芍、黄芪、桂枝等十四味 药经加工制成。具有温中健脾，理气和胃之功效。主治脾胃虚 寒型的慢性萎缩性胃炎，适用于胃脘胀痛、痞闷不适，喜热喜 按，嗳气呃逆等症。参芪健胃颗粒收载于卫生部药品标准中药 成方制剂第十册 ，标准中只有鉴别项，为有效控制产品质量， 本文参考有关文献 ，采用高效液相色谱法（ＨＰＬＣ）对处方中自 芍的有效成分芍药苷含量进行了测定，经方法学验证，结果较 满意。 ． ２ 。 山 ！ ／＼ ＾ ●’ ？ ，ｔ— １仪器与试药 ｒ ＬＣ一２０１０ＣＨＴ型全自动高效液相色谱仪（日本岛津公司）， ９２ＳＭ一２０２Ａ—ＤＲ电子分析天平，超声波震荡器。 芍药苷对照品（中国药品生物制品检定所，批号：０７３６—２００９３４， 含量：９５．７％）。参芪健胃颗粒样品（河南辅仁堂制药有限公司， 批号：２００９１２１Ｏ、２０１００２１５）。乙腈为色谱纯，重蒸馏水，磷酸、 乙醇、甲醇为分析纯。 ｕ ．一 ２溶液的制备 ２．１对照品溶液 ０ ０ ２暑 ５ ０ ７ ５ 精密称取芍药苷对照品４．７２ｒａｇ，置２５ｍＬ量瓶中，加甲醇溶 解并稀释至刻度，摇匀，精密量取１５ｍＬ置５０ｍＬ量瓶中，加甲醇 稀释至刻度，摇匀，即得。 …ｂ Ｉ ｌ ｆ ＿ 、２．２供试品溶液 取本品内容物，精密称取２．０６１０ｇ，置具塞锥形瓶中，精密加 入６０％甲醇５０ｍＬ，称定重量，超声处理（功率：２５０Ｗ，频率： ４０ｋＨｚ）３０ｍｉｎ，放冷，再用６０％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤 过，取续滤液，即得。 ２－３阴性样品溶液 按处方比例及制备工艺，配制不含芍药苷的阴性对照样品， 照“２．２”项下方法制备阴性样品溶液。 … 】ｒ ｊ苦： 。 ＾ ＾ ’ ，，、 — ， ． ’３方法与结果 ３．１色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：ＳｈｉｍｐａｃｋＶＰ—ＯＤＳＣｌ８（４．６ｍｍＸ １５ｅｍ，５ ｍ）；流 动相为乙腈一０．１％磷酸溶液（１４：８６），检测波长为２３０ｎｍ，流速为 ０．８ｍＬ・ｒａｉｎ＜，柱温为３０％，进样量１Ｏ ｌ。 在上述条件下理论板数按芍药苷峰计算为５２９９，芍药苷峰 与其它峰能达到基线分离，阴性对照无干扰，色谱图如下： ａ．对照品； ｂ．样品； ｃ．阴性样品； 峰为芍药苷。 ３．２线性关系考察 分别精密吸取芍药苷对照品溶液（浓度为０．０５４２ｍｇ・ｍＬ－ ）３、 ５、８、１０、１２、１５、２０ ｌ注入液相色谱仪，测定峰面积，以进 样量（ ｇ）为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，求得回归方程： Ｙ＝１７４００５３Ｘ＋２８３４５ ｒ＝－０．９９９６ 实验结果表明：芍药苷进样量在０．１６２６～１．０８４１ ｇ范围 内，线性关系良好。 ３．３精密度试验 精密吸取对照品溶液（批号：２００９１２１０），连续进样６次， 中国中医药咨讯 ・２４・ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｈｉｎａ Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃｈｉｌｌｅ，￣ｅ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ ２０１１年７月中 Ｊｕｌｙ ２０１１ 第３卷第２０期 Ｖ＿０１＿３ Ｎｏ．２０ 测得芍药苷峰面积的平均值为９９５８０２，ＲＳＤ为０．７９％。 ３．４稳定性试验 ． 取供试品溶液（批号：２００９１２１０），按上述色谱条件分别 于０、２、５、８、１２ｈ测定，其峰面积的平均值为４８４７２３，ＲＳＤ 为１．１２％，结果表明供试品溶液制备１２ｈ稳定。 ３．５重复性试验 取同一批号样品（批号：２００９１２１０）６份，按“２．２“项下 制备供试品溶液，在上述色谱条件下测定，芍药苷含量的平均 值为０．６４０１ｍｇ・ｇ－ ，ＲＳＤ为１．２４％。结果表明，重复性良好。 ３．６加样回收率试验 精密量取已知含量的供试品溶液（０．０２６３８ ｍｇ・ｍＬ－ ）３ｍＬ 共６份，分成３组，各置于１０ｍＬ量瓶中，每组各精密加入对照品溶 液３、５、７ ｍＬ，再加甲醇至刻度，摇匀，按上述色谱条件测定 其含量，计算回收率，测定结果见表１。 表１加样回收率试验结果（ｎ 取２批样品，依法制定供试品溶液，分别按以上方法，按峰面 积以外标法计算其含量，结果见表２。 表２ ２批样品的测定结果（ｍｇ・ｇ－ ） ４讨论 参照有关标准 ，选择２３０ｎｍ作为芍药苷含量测定的波长。 参考文献 的样品制备方法，分别以稀乙醇溶液、６０％甲醇 溶液作为超声提取溶剂，实验发现以６ｏ％甲醇、超声３０ｍｉｎ处 理的样品溶液峰形较好，保留时间适中，且峰面积和出峰时间较 稳定。 本文采用高效液相色谱法，选用芍药苷作为指标性成分，对 参芪健胃颗粒中的白芍含量进行有效的质量控制。在分别对精 密度、稳定性、重复性和回收率进行考察后，认为所建立的方 法稳定、准确、可行，能有效的控制该药的内在质量。 参考文献 ［１】卫生部药品标准［ｓ】．中药成方制剂第十册，ＷＳ３．Ｂ一１９７３。９５． ［２】中国药典【ｓ】．一部，２０１０：９６—９７． ３．７样品测定 【３］贾乐陶，王慧，陈进等．高效液相色谱法测定心舒宝胶囊中芍药苷含 量 ．中国药业，２００８（２）． ・・ｏ－・－ｔ０ ・・＜ ・・ －・・◇・・◇・・◇”－—０ －・◇・ 》・・— ・・— －・－ｏ－・・・ －—・ －・・◇・ｔ・ －・◇ ・・ －・・◇・—◇・◇・◇－・０ ・・・Ｅ０｝・一（＞＿—‘０ 夺 ・ ・＜＞・・◇・・・０ ・・０－・－◇・ ｝－・◇・— ・令・・０－・ （上接第２２页） ４讨论 急性肠炎是消化科的常见病、多发病，给患者生活、身体 带来诸多不适。治疗上滥用抗生素及不合理使用静脉输液成为 该病的严重问题。国内学者据我国病原谱组成及临床观察发现 不需要抗生素治疗的急性腹泻约占８０％翻。滥用抗生素不仅增 加患者的经济负担，且可出现肠道菌群失调等一系列不良反应， 细菌耐药情况越来越严重，为真正需要抗生素治疗的病人带来 困难。本研究纳入的病例，均无明显需要抗生素的指征，此情 况下，中医药治疗有相当的优势。 急性肠炎属中医“泄泻”范畴。病因多为饮食不节、不洁 损伤脾胃。脾主运化水湿及水谷精微，升清为主，脾失健运则 水谷不化，脾不升清，浊气并走大肠而致腹泻，本病病位虽在 肠，但与脾密切相关。夏季天气炎热、潮湿，热气下迫，地湿 上腾，湿热交蒸。夏季人们毛孔疏松，湿热之邪易从外而入； 加上人们多喜冷贪凉，易伤脾胃，脾不运化，湿热下注，故夏 季多见湿热泻。 番石榴叶为广东、广西民间药材，是桃金娘科植物番石榴 的叶子，其味甘、涩，性平，无毒；归脾、胃、大肠、肝经， 功用为涩肠止泻，收敛止血。其止泻以鲜品为佳。根据现代医 学对其止泻机理的研究，番石榴叶含用石榴甙、扁蓄甙、槲皮 素、生长甙、番石榴酸等，此外还含有大量鞣质及少量挥发油。 实验提示认为其可抑制细菌生长；抑制病毒繁殖；促进小肠吸 收Ｎａ和糖；分泌ｓＩ ；抑制小肠运动，延长食物滞留时间； 解痉镇痛和保护小肠粘膜等。因番石榴叶可促进水、钠吸收， 故可减少粪质的水分，改善水样泻的情况。而在急性腹泻中， 因病原体的病理产物可引起肠道痉挛而引起腹痛，细菌或其它 病原产气过多可引起腹胀等临床不适症状，因番石榴叶可抑制 肠道病原（细菌、病毒）的繁殖生长，可在不同程度上清除病 原的病理产物，其促进肠道活性物质的分泌，维护肠道的屏障 功能 ，故在理论上可改善腹痛、腹胀、发热等症状，而从本实 验研究也证实了以上理论，番石榴叶不仅能止泻，而且能改善 腹泻伴随的相关临床症状。 本来番石榴叶性味甘涩平，按中医性味推测其作用，应为 收敛止泻，一般湿热泻不主张过早使用收涩药，但通过本研发 发现，番石榴叶虽有收涩的作用，但并没有出现留邪的情况， 提示了番石榴叶可能并非单纯的收涩剂，可能还存在清热利湿 的作用，其性味与功效有待进一步研究。 通过本研究，新鲜番石榴叶在治疗湿热型腹泻疗效肯定， 而番石榴树在两广地区的广大地区广有种栽，采摘方便，价格 低廉，运用简单，本方案适合在广大农村及经济欠发达的地区 推广。 参考文献 ［１】中华中医药学会脾胃病分会．中医消化病诊疗指南【Ｍ】．北京：中 国中医药出版社，２００６：７７—７９． ’ ［２】赵卓，齐明，王树伟．２０００例成人急性腹泻病例流行病学分析【Ｊ】．预 防医学情报杂志，２００１，１７（３）：２００．２０１． 【３】陈国宝，陈宝田，王沈歌，等．番石 究 【Ｊ】．新中医，２００３，’３５（１２）：６５．６８．