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DNA Marker 使用问题分析

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DNA Marker 使用问题分析

条带模糊

• 凝胶浓度不合适

• 对于长片段,低浓度胶分离效果好;对于小片段,高浓度的胶分辨率高。

• 电泳缓冲液缓冲能力差

• 电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。

• 电压太高,电泳时间长

• 电泳时电压不应该超过20V/cm,电泳温度应该低于30℃。如果电泳时电压和温度过高,可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太高易出现缺带现象。

• 电泳过程中由于会产热,因此电泳时间长容易发生带模糊,特别是小片段会变的模糊。

• 凝胶放置时间太长

• DNA上样量多

• 琼脂糖的质量差,导致DNA条带分辨率

亮度不够

• 上样量少

• EB浓度低

• 如电泳结束后,用 EB染胶的方法,则染胶时间短。

DNA Marker 降解

• 污染了核酸外切酶。建议用灭菌的枪头,用后及时将管盖拧紧。

• 点样时将电泳缓冲液带入DNA Marker中,建议及时更换枪头。

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