DNA Marker 使用问题分析
条带模糊
• 凝胶浓度不合适
• 对于长片段,低浓度胶分离效果好;对于小片段,高浓度的胶分辨率高。
• 电泳缓冲液缓冲能力差
• 电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH值上升,缓冲性能下降,可使DNA电泳产生条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。
• 电压太高,电泳时间长
• 电泳时电压不应该超过20V/cm,电泳温度应该低于30℃。如果电泳时电压和温度过高,可能导致出现条带模糊和不规则的DNA带迁移的现象。特别是电压太高易出现缺带现象。
• 电泳过程中由于会产热,因此电泳时间长容易发生带模糊,特别是小片段会变的模糊。
• 凝胶放置时间太长
• DNA上样量多
• 琼脂糖的质量差,导致DNA条带分辨率
亮度不够
• 上样量少
• EB浓度低
• 如电泳结束后,用 EB染胶的方法,则染胶时间短。
DNA Marker 降解
• 污染了核酸外切酶。建议用灭菌的枪头,用后及时将管盖拧紧。
• 点样时将电泳缓冲液带入DNA Marker中,建议及时更换枪头。
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